肌钙蛋白I检测方法的研究进展.pdfVIP

维普资讯 实用医学杂志2008年第三I4卷第8期 1275 肌钙蛋 白I检测方法的研究进展 王 峰 向定成 肌钙蛋 白是组成横纹肌细肌丝的结构蛋 白，其亚单位 I、 示：Access和ACS．18O检测仪的敏感性分别为97％、63％，特异 T和 C组成复合物．在肌肉收缩和舒张过程 中起着重要调节作 性分别为 】8％、87％，两者的相关系数 r=0、89，后者较前者用 用。其中，肌钙蛋 白I(cTnI)经大量的研究，已被证实为心肌损 于检测 c_rnI更为精确 、 伤最特异、最敏感的血清标志物之一[。正常人血液中含量一 3 酶联荧光分析法 般低于O．3Ixg／L．当心肌细胞胞膜完整性因缺血或缺氧等受 酶联荧光分析法是法 国梅里埃公 司开发的一种检测新技 到破坏时．游离的cTnI可迅速透过细胞膜进入血流。因此，在 术 (VIDAScTnI) 。其采用了一步夹心与酶联荧光相结合的方 发病初期．快速、灵敏且准确地测定人血 中的cTnI及其变化趋 法。检测时，将患者血清样本吸入 固相针 内。cTnI与固相针 内 势对于急性心肌梗死的诊断、急性冠状动脉综合征的危险分 墙包被的cTnI单克隆抗体结合 。未结合的cTnI通过洗涤被除 层、监测各种因素导致的心肌损伤等有着重要的临床意义。本 去．标记ALP的cTnI单克隆抗体吸入 固相针 内．与待测定的 文就 eTnI的检测方 法综述如 下 cTnI捆绑形成结合三明治．底物 4一甲基伞形酮磷酸盐在 固相 1 酶联免疫吸附法 (ELISA) 针内循环进 出，被 ALP催化水解成荧光产物4一甲基伞形酮 ． ELISA是 1971年瑞士学者Engrall等首次报道的一种酶 在 450nm 处检测其荧光值 cTnI含量与扣除本底后的荧光值 标固相免疫测定技术 该方法伴随着抗体制备技术、酶免疫技 成正比。仪器通过多点定标曲线 自动计算样本中cTnI浓度。该 术等的不断发展 ．现 已成为一种经典的、被广泛应用于临床的 方法具有操作简便、自动化程度高、测定快速、结果准确可靠等 免疫测定技术。国外，Cummins、Lame、Cho等 []相继对 ELISA 特点。检测范围为O．1～50Ixg／L，CV5％，与骨骼肌肌钙蛋 白 法测定血清 cTnI进行了一系列研究．并在前人研究的基础上 T(sTnT)、骨骼肌肌钙蛋白I(sTnI)和心肌肌钙蛋白c等几乎没 对测定方法作 出了各 自的改进 ．如 以单克隆抗体取代多克隆抗 有交叉反应．15rain内可得测定结果。 体包被 固相载体，以辣根过氧化物酶 (HRP)取代碱性磷酸酶 4 胶体金免疫层析法 (ICA) (ALP)作为标记酶．使检测灵敏度 由4Ixg／L精确至 O．1～O．2 免疫金技术是继放射性 同位素标记 、酶标记、发光荧光标 Ixg／L。国内，李志梁、李瑞等 [3-4]将生物素一亲和素放大技术引 记之后的又一大标记技术 胶体金由于具有特殊的光学性质和 入ELISA法中，用于检测肌钙蛋白。其用生物素标记抗体 ，以 电性质，例如显色性、导电性和非线性光学特性等，在免疫分析 链霉亲和素连接HRP。利用链霉亲和素可以结合多个生物素 方面有着其独特的优势。 目前，金标免疫法主要是应用到与免 的方法实现灵敏度的提高。但是 ，由于 cTnI血清含量偏低 ，临 疫层析技术相结合的ICA中。该法标本用量少，简便快速 ，适 床需快速检测。而ELISA法存在着测定周期偏长、灵敏度相对 合于cTnI的床旁检测。国外在这方面的研究相对较多．如美国 较低、线型范围偏窄等诸多不足，因而限制了该法在 cTnI检测 的 SpectralDiagnostics公司、德