卵巢癌细胞ERCC1基因ⅤⅢ外显子剪接变异与功能研究.pdfVIP

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—419一 文章编号:100r7—4287(2004)04—419—05 l基因VIII外显子 卵巢癌细胞ERCC 剪接变异及功能研究 Jie Reed2 李体远1量,JingYu2,Eddie (1.暨南大学堰学院附二院深圳市人民医院,广东深圳5180∞; 2.wjst Babb c鲫cer 26506—9300) ViIginjaumversity,MaryR锄ddph ceIlter,M(曙咖oⅦ,westvirginia 摘要:目的确认卵巢癌细胞ERccl基因ⅥⅡ外显子剪接变异的存在,探讨该剪接变异对ERccl基因表达的作 用及其对卵巢癌细胞对铂类药物耐药性的影响。方法采用N硼km杂交及RNA酶保护分析确认人卵巢癌细胞内 班配c1基因调控区在砌峨水平存在剪接变异。分别构建野生型及缺失ⅦI外显子的ERccl表达载体,转染中国仓鼠 卵巢43.3B细胞,采用we啦m 细胞克隆形成实验研究该剪接变异细胞对铂类药物耐药性的影响。结果 卵巢癌细胞ER(、Cl基因Ⅷ外显子存在 剪接变异。westemblot结果显示该剪接变异不显著影响ERCcl表达水平,但CH043.3B细胞砌【’I及细胞克隆形成实 验表明,该剪接变异显著影响细胞对顺铂的耐药性。结论本研究首次证明人卵巢癌细胞、组织ERccl基因Ⅷ外 显子存在剪接变异,该变异不显著影响ERccl基因的绝对表达水平,但影响细胞对顺铂的耐药性。 关键词:Ⅱ配c1、,III外显子,剪接变异;DNA损伤修复;顺铂,耐药 中图分类号:R737.31 文献标识码:A M 慨删洲,五蝴蝴,踟洳雠’s№删,跳幽,518020,缸,咖愕,‰;2.撕鼬6删 锄Cb,蛔’。耽站砌画n施[,nh聊蜘r,躲愕硼泐硼,耽站%砂妇26506—9300) 0fERCClaIld Al搭蛔ct:0bjecti靶To肼鹏the讪d畸0fex∞Ⅷaherr戚vespHciIlg studyits缸把矗∞∞the懿印essi∞of ardther0:Icin 0f a耐canoer Northem and Ⅸ配c1 tIIe R№∞ gerIe de他岫mp:陆nun卜ba8ed dnlg瑚is趾躜.Men_Ddsbk施ng iII iII weIe鸺edt0 ex吼Ⅷ8】如锄曲e RNAlevdboIlI姗Ii蛆car瞅oell1ir螂arKlhu瑚n p眦ecti∞a8say prD鸭E日ccl spliciIlg to o谢蛐c删tis8∞.w眵觚№惝璐ed 8nd w鼬usedto d曲ectⅡ屺c1麟pr髑i傩kvel.Mrroell蝴删∞麟媳y tI地‰tion0ftIle iIlCHO43-3B.m辄№N0rd嘲ma11d 咖dy ah瞰戚ve讪cillg U抽Ilg assay瑚u1协shawed RN蹴雕nectioII evidance0f礤屺C1洲Ⅷalt蹦戚veinRNAkvd0f

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