海风藤提取物对D半乳糖脑老化模型小鼠行为学海马神经细胞线粒体膜电位及凋亡的影响.pdfVIP

廑在差笠显迅蕉握亟翅盟望：坐乳撞膻耄丝搓型』!鼠盈趁堂!遵璺益经绁照缝蕉签堪鱼焦区迥亡塑毖咆箜!i塑 ·1555· 海风藤提取物对D一半乳糖脑老化模型小鼠行为学、海马神经细胞 线粒体膜电位及凋亡的影响 庞在英李桂荣1 杜怡峰(山东省立医院，山东 济南250021) [摘要] 复制小鼠脑老化模型，随机分为模型组和海风藤治疗组，正常对照组采用健康昆明种小鼠。海风藤组每天给予腹腔注射海风藤注射液1次，每次1 ml／100 g体重；模型组和正常对照组给予等量2．5％二甲基亚砜；10W后成模。应用水迷宫试验观察小鼠学习记忆功能的变化，应用流式细胞术分 析海马神经细胞凋亡率和线粒体膜电位的变化。结果①水迷宫结果显示，模型组小鼠第3、4、5天游完全程的时间和错误反应次数均较正常对照 风藤能够明显改善该小鼠的学习和记忆能力，其作用机制可能是通过稳定线粒体膜电位、抑制凋亡的发生而实现的。 [关键词]D一半乳糖；脑老化模型；海风藤；线粒体膜电位；凋亡 (中图分类号)R749．1(文献标识码]A(文章编号]1005-9202(2007)16-1555．03 老年性痴呆(AD)是一种与老化有关的中枢神经系统退变 1．2 方法 性疾病，海马及基底前脑等部位的大量神经元死亡是其显著的 1．2．1模型建立及给药方法小鼠随机分为正常对照组、模 病理学特征之一【1J，在AD病理过程中细胞凋亡可能是神经元 50 型组、海风藤组，每组20只。海风藤组：D—galmg·kg一·d“ 死亡的主要形式旧’3’。研究还发现在细胞凋亡过程中线粒体可 皮下注射，同时每天给予腹腔注射海风藤注射液1次，每次 能起重要作用H“J。海风藤系胡椒科胡椒属植物，具有神经保 100 g体重注射1ml；模型组：D一列50mg·kg～·d。皮下注 护作用，能够显著阻止缺血后的神经细胞钙超载及降低兴奋性 射；正常对照组：生理盐水0．2ml·kg一·d。皮下注射。模型 氨基酸和自由基含量¨t8】。D．半乳糖(D．gal)老化模型由我国 学者首先提出，并且研究表明该模型具有脑老化效应峥川。但 组均注射8W。 D．gal脑老化模型小鼠在其病理老化过程中有无海马神经细胞 1．2．2学习记忆能力测试水迷宫水深15cm，水温(25± 线粒体膜电位及细胞凋亡的变化，海风藤能否对其产生影响尚 2)oC，将小鼠尾部朝向安全岛放入起始区，每天训练2次，连续 不完全清楚。本研究采用水迷宫实验和流式细胞术，分别观察 5 了D．gal脑老化模型小鼠的行为学改变和海马神经细胞线粒体 以头部碰到盲端为1次错误。记录每只小鼠游完全程的时间 膜电位、凋亡发生率变化以及海风藤对其影响，以为阐明AD 及错误次数，以评价小鼠的学习记忆功能。 发生机制及寻找干预措施提供依据。 1．2．3海马神经细胞线粒体膜电位检测将动物断头取脑后 分离出海马，后置于盛有生理盐水的中号培养皿中，用两张洁 1材料与方法 净处理的载玻片轻轻研磨组织至匀浆状，经300目筛网过滤后 1．1 材料 000 即为单细胞悬液。然后以5 r／min，室温下离心2min，倾去 1．1．1动物雄性昆明种小鼠[合格证号：SCXK(京)2002- 上清，加入10斗g／Inl的Jc-1，室温避光15min后进行流式细胞 2003]60只，鼠龄2．5月，体重(40±8)g，由中国医学科学院实