透明质酸提取工艺研究.pdfVIP

第 7 卷第 2 期 过 程 工 程 学 报 Vol.7 No.2 2007 年 4 月 The Chinese Journal of Process Engineering Apr. 2007 基于发酵液特性的透明质酸提取预处理工艺 邓 禹， 堵国成， 李秀芬， 刘登如， 陈 坚 (江南大学工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 214036) 摘 要：为进一步提高透明质酸成品质量和提取收率，针对透明质酸发酵液中菌体和蛋白质的物化特性，采用 25 g/L 三氯乙酸灭活菌体并使蛋白质变性沉淀，以发酵液质量 1.2%的混合硅藻土(粗细硅藻土比为 1.5:1)为过滤助剂，过滤 温度 60 ℃，pH 7.0 的发酵液预处理工艺提取透明质酸成品. 再配以酒精沉淀、气浮、酒精造粒的后处理工艺，所得成 品透明质酸中葡萄糖醛酸含量达46.39% ，蛋白质含量仅为 0.047%，分子量为 190 万，提取收率为 91.3%. 关键词：透明质酸提取；预处理；三氯乙酸；硅藻土 中图分类号：Q539 文献标识码：A 文章编号：1009−606X(2007)02−0380−05 1 前 言 产) 由江南大学环境生物技术研究室提供，HA 含量为 5.58 g/L，蛋白质含量为2.74 g/L. 硅藻土(SiO285%)购 透明质酸 (Hyaluronan, HA) 是一种由 β-(1-3) 和 自吉林省白山市科学技术研究所. 1.2 µm 微孔滤板由杰 β-(1-4)糖苷键连接的 D-葡萄糖醛酸和 N- 乙酰氨基葡萄 能科(无锡)生物工程有限公司赠送. 测定用葡萄糖醛酸 糖为双糖单位的高分子线性多糖[1,2] ，被广泛应用于医 标准品购自 Sigma 公司，盐酸−氨基葡萄糖标准品和牛 药、化妆品、粘性补充治疗和药物包埋等领域[3,4]. 目前， 血清白蛋白购自国药集团化学试剂有限公司，其他试剂 应用于医药、化妆品等领域的透明质酸主要由细菌发酵 均为国产分析纯. 生产. 透明质酸发酵液中菌体和蛋白质等杂质的存在给 2.2 实验仪器 透明质酸的提取和精制带来极大的困难，同时也降低了 2 过滤面积为 0.02 m 的带有换热夹套的硅藻土抽滤 透明质酸的品质，限制了其应用范围. 如何有效地去除 2 装置和过滤面积为 0.02 m 的微孔滤板抽滤装置均由本 这些杂质对获得高品质的透明质酸和扩大其应用范围 实验室自制，紫外扫描采用岛津 UV2450 型紫外−可见 具有重要的意义. 光自动扫描分光光度仪，MOA-P101-CD 型空压机由美 目前报道的去除HA 发酵液中菌体和蛋白质等杂质 国GAST Manufacturing 公司生产，JB90-D 型强力电动 的方法有季铵盐法[5] [6] [7]