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信息检索综述 分子生物学技术在生药鉴定中的研究进展 【摘　要】 生药学是一门传统而又充满生机的学科，生药的品质评价及质量控制是生药学科的主要研究方向之一，本文围绕近些年生药鉴定生物新技术的发展情况，对其中在生药鉴定方面应用较广的分子生物学技术的研究进展做以下综述。 【关键词】 生药学，生药鉴定;分子生物学 生药学的发展经历了很大的变革，它在发展实践中确立了了以本草考证、资源调查、原植物鉴定、商品调查、药材性状鉴定、显微鉴定、化学成分、药理作用、理化分析为研究内容的现代生药学,随着中医药事业的发展和中药现代化的不断深入,以及现代生物技术、化学、药学、仪器分析和计算机科学的飞速发展,生药学研究经历了从传统植物器官水平到组织水平、细胞水平和分子水平的发展过程。新技术新方法的运用有力地促进了生药学的发展， 如今，分子生物学技术在生药药领域已得到广泛应用，尤其是在生药药鉴定和质量控制方面，取得了巨大的发展。 生药传统鉴别与质量控制 传统的生药药鉴定是利用植物或动物的形态分类学特征和解剖学特征，从基原﹑外观性状﹑显微特征和理化性质等方面进行鉴别。外观性状的鉴别仅适用于较为完整的动植物药材，在很大程度上是一种经验的总结，但药材的外观性状易受光照﹑水分﹑温度等多种因素的影响，可能发生气味﹑颜色的变异，使得外观性状发生改变，性状鉴别就不再适用。此外，大部分药材经加工、炮制等处理后, 往往失去了原来的形态和解剖学特征，甚至显微特征也会发生改变，这就使药材的真伪优劣难以鉴别，再加上一些人为了暴利，不顾消费者和患者的安危，以次充好，以假乱真，如贵重中药材冬虫夏草的伪品就有好多种，难以鉴别，因此假劣药材、混淆品充斥着中药材市场，极大的影响了我国中医药事业的发展。而复方制剂, 由于药味多，外观复杂，成分多样，难以通过传统的形态鉴别方法来鉴别。近年来, 分子生物学技术的发展和应用, 使生药学研究从植物植株、器官水平，逐步向组织水平、细胞水平和分子水平不断深入，使中药材鉴别从器官水平提高到细胞水平和分子水平。 生药鉴定的新技术—分子生物学技术 近年来，随着生物新技术的层出不穷，生药鉴别的方法也发生了突飞猛进的的发展，尤其是分子生物学技术在生药鉴定中的应用日益成熟，为生药鉴定方法的革新奠定了基础。生药鉴定的生物新技术包括电泳技术﹑免疫技术﹑细胞生物学技术和分子生物学技术，下面具体以分子生物学技术为例，详尽阐述它在生药鉴定中的应用和发展。 20世纪50年代,Watson 和Crick 提出了脱氧核糖核酸(DNA )的双螺旋结构模型, 并阐明了DNA 是遗传信息的携带者, 从而开辟了现代分子生物学的新纪元。DNA 分子作为生物遗传信息的直接载体,同种药用植物或动物的每一个体的所有细胞均包含相同的遗传信息,他们具有相同的遗传物质DNA, 它不受气候、土壤等环境影响, 也不会随个体发育阶段或因组织器官的不同而不同。因此DNA 分子标记技术为原植物或动物形态已遭到破坏的药材的鉴别提供了新的技术途径。实践证明，该方法取材少，结果准确，克服了以往中药鉴定的诸多不足，具有一定的优势。 DNA分子遗传标记技术 DNA分子鉴定[3]是一种根据不同生物个体的遗传物质DNA的差异来鉴别生物物种的方法。因为生物的外观性状、细胞形态、组织结构、化学成分、蛋白质等不仅受遗传因素的影响, 还与生物的生长环境、发育阶段、生理状态等有关。而DNA 作为遗传信息的直接载体, 不受上述因素的影响, 因此DNA 分子遗传标记鉴别药材的方法比其他的新方法更具有高度的准确性与可靠性。 限制性片段长度多态性分析技术（RFLP） RFLP是70 年代发展起来的DNA片段诊断技术，他是将药材的DNA片段, 用限制性内切酶消化后, 进行限制性片段长度多态性( RFLP) 分析,也要对药材DNA的PCR扩增产物进行限制性片段长度多态性（PCR- RFLP)分析，确定其基因的种属特异性,从而鉴别药材品种, Mizukami等[6]用PCR-RFLP 技术对茅苍术、关苍术、白术的r-DNA进行研究，发现Sac/RFLP 图谱差异明显，能准确区分3 种植物。马小军等[1]对人参的研究表明, 对RAPD 反应产物进行限制性内切进行RFLP分析, 能有效提高DNA 指纹的使用效率。吴平等[9]从5 种海马干燥标本中提取DNA,用PCR 技术扩增12SrRNA 和Cytb基因片段并进行RFLP分析, 结果12SrRNA 基因比Cyt b基因保守,说明在用PCR-RFLP方法进行中药材的分子鉴定, 应选择进化速率较快的基因。 随机扩增多态DNA技术(RAPD) 用任意非特异性的单一引物在低温条件下与模板复性并进行PCR 扩增,可对研究对象的基因组DNA 作多态性分析,