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马铃薯试管薯诱导体系优化的研究 唐亚宁，王天云 甘肃农业大学生命科学技术学院，甘肃兰州 （730070 ） E-mail ：yntang@ 摘 要：对马铃薯试管薯形成的培养基类型及外植体接种密度进行了研究，结果表明：液体 培养基比固体培养基更有利于试管薯的诱导产生，产生的试管薯各项指标均优于固体培养 基； 5mg/L 6-BA 的添加可有效提高结薯率和增加块茎直径；每瓶接种9 个外植体即能获得 较多的试管薯数，且试管薯的质量也较高。 关键词：马铃薯；试管薯；诱导；培养基；接种密度 中图分类号：S533 马铃薯试管薯是在脱毒试管苗之后发展出的保存种质和生产无毒种薯的新形式[1] 。20 世纪80 年代，Kim 首先报道了用组培法诱导微型薯[2] ，引起了国内外学者普遍重视。马铃 薯试管微型薯具有体积小，重量轻，生产不受季节限制，易储藏，繁殖速度高于常规田间生 产，栽培成活率高等突出优点，并且用于优良种质的保存，运输和推广较其他形式更加便捷， 而且离体条件下诱导马铃薯块茎的形成也是研究马铃薯块茎形成机理较为理想的方法[3，4] 。 微型薯还在当今马铃薯基因工程研究中作基因转移的受体，另外，它也被用来进行快速繁殖， 作为种薯生产的一部分。 在马铃薯脱毒试管薯生产中，要求生产的试管薯产量高，质量好，成本低[5]，这是马铃 薯试管薯生产的基本要求。本试验的目的在于比较马铃薯试管苗在不同培养基，不同的接种 密度形成试管薯的效率，从而选择最优组合，也为下一步研究提供合理依据。 1. 材料与方法 1.1 材料 选用马铃薯普通栽培种“Atlantic”脱毒试管苗为供试材料。 1.2 方法 1.2.1 脱毒试管苗的繁殖 将试管苗在无菌条件下切成茎段，并转接到MS 基本培养基+3%蔗糖+0.45%琼脂，pH 值5.8 。用150ml 三角瓶培养，每瓶装50ml 固体培养基，接种10 个茎段，在22℃，2000LX 连续光照下培养三周，形成壮苗。 1.2.2 不同培养基对马铃薯“Atlantic”微型薯的诱导的方法比较 将所得壮苗按繁殖方式切成留有一个芽的茎段，并转移到培养基A ，B ，C，D 上诱导 结薯。其培养基成分的配制如表1 中。每三角瓶内放9 株，内装有50ml 培养基，在22℃， 2000LX 连续光照下培养三周后，置于黑暗中于20℃条件下诱导结薯，六周后收获微型薯。 - 1 - 表 1 微型薯诱导所用培养基成分 代码 成分 　 ────────────────────────────────── 固体培养基： A MS+8% 的蔗糖+0.45% 的琼脂+0.1%活性炭+5mg/L 6-BA B MS+8% 的蔗糖+0.45% 的琼脂+0.1%活性炭 ────────────────────────────────── 液体培养基： C MS+8% 的蔗糖+0.1%活性炭+5mg/L 6-BA D MS+8% 的蔗糖+0.1%活性炭 ────────────────────────────────── 1.2.3 不同接种密度对“Atlantic”试管薯形成的影响 将“Atlantic” 带一叶单茎的切段各自按每瓶5，9，13 个接种在150ml 的三角瓶中，每 处理接种10 瓶，置于22℃，2000LX 连续光照的液体MS 培养基中浅层静置培养三周后， 加入MS+8% 的蔗糖+0.1%活性炭+5mg/l 6-BA 的液体诱导培养基，于温度为20℃的全黑条 件下诱导结薯，六周后收获微型薯。 1.3 试验数据的收集与整理