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第一章 微生物的遗传物质 1、如何保证真核染色体在每个细胞周期中只复制一次？ 答：真核细胞DNA复制的起始分两步进行，即复制基因的选择和复制起点的激活。复制基因的选择出现在G1期，基因组的每个复制基因位点均组装前复制复合物（pre-RC）。复制起点的激活出现在细胞进入S期以后，这一阶段将激活pre-RC，募集若干复制基因结合蛋和DNA聚合酶，并起始DNA解旋。复制基因的识别与DNA解旋、募集DNA聚合酶这两个阶段相分离可以确保每个染色体在每个细胞周期中仅复制一次。 2、何谓基因簇、基因家族、假基因？ 假基因（pseudogene）：是指与功能基因密切相关的DNA序列，但由于缺失、插入和无义突变失去阅读框架而不能编码蛋白质产物。 基因家族：真核生物的基因组中有许多来源相同、结构相似、功能相关的基因，这样的一组基因成为基因家族（gene family）。 基因簇：基因家族的成员在染色体上的分布形式是不同的，其中一些基因家族的成员紧密成簇排列成大段的串联重复单位，定位于染色体上的特殊区域上形成基因簇（gene cluster） 第二章基因突变和损伤DNA的修复 1、为什么说自发突变与环境无直接对应关系？简述引起自发突变的原因？ ①波动实验说明大肠杆菌抗噬菌突变不是由于接触环境后而产生的，而是在它们接触噬菌体以前，在某次细胞分裂过程中随机产生的。噬菌体仅作为筛选抗噬菌体突变的手段。 ②如果细菌的抗性突变是由噬菌体诱发产生的，那么未经涂布和重新涂布的抗性菌落数应该接近或相同；如果抗性突变是在接触噬菌体以前产生的，则如在不经涂布的培养皿上他们形成一个菌落，在重新涂布的培养皿上，就回出现更多的菌落。从涂布试验中看出，在重新涂布的培养皿上出现的抗性菌落比未经涂布的多，而且重新涂布培养时间越长，则两者的差别越大。说明大肠杆菌对T1噬菌体的抗性的产生与T1噬菌体无关。 ③影印培养更能直接证明抗药性突变产生于药物接触前，与药物的存在无关。 因此自发突变与环境无直接对应关系。 引起自发突变的原因： （1）DNA分子内部运动 ①碱基脱氨基作用 ②互变异构效应：“T”和“G”可以酮式或烯醇式两种状态存在，酮式与“A”配对，烯醇式与“G”配对。“C”和“A”则可以氨基或亚氨基两种状态存在，“C”的亚氨基与“A”配对。 （2）DNA的环出效应与缺失 自发产生缺失的机制，可能与DNA在复制或修复中的差错有关，一条DNA链发生环状突起，当复制进行时环状突起区域不复制，这样环状突起区域在子代中就发生缺失。 （3） 自身代谢产物：硫氢化合物、重氮丝氨酸、过氧化氢等 （4）环境因素：各种短波辐射、高温、低浓度诱变物质等 2、何谓适应突变？与随机突变的区别（新增）？ 适应突变：指微生物细胞群体在非致死的选择条件下，延长培养时间时处在不分裂或缓慢分裂的状态下，细胞发生的一种自发突变。 区别：当F’40细胞被涂布于以乳糖为惟一碳源的选择平板延长培养时, Lac+回复子菌落可在涂平板后的几天内不断产生, 而在同一时期内, 未被选择的中性基因的突变频率没有增加, 这些回复子可归于两种来源, 即依赖于生长的发生在涂平板前的随机突变和不依赖于生长发生在选择平板上的非随机突变, 称后者为定向突变，其后被称之为适应突变(adaptive mutation). 3、回复突变产生的原因（新增）？一定条件下，羟胺处理突变体得到和未得到回复突变体各说明什么问题？ 原因：野生型基因可以通过突变成为突变型基因，同样突变型基因也可以通过突变成为野生型基因称为回复突变。回复突变产生原因可能有三个：第一类真正的基因回复突变，即原突变位点的回复;第二类是由同一基因不同位点的突变所导致的基因内抑制突变；第三类是由于基因不同位点发生的基因突变而抑制了原有突变基因的表达，这种情况又称作抑制基因突变。 羟胺处理说明的问题：由于羟胺是诱发G:C→A:T的专一性诱变剂，因此，可以用来鉴别突变体是 A:T→G:C还是G:C→A:T转换。如果用羟胺处理突变体后，产生回复转换突变体，说明原来突变是由A:T→G:C转换；如果羟胺诱发突变体的结果不产生回复突变体，说明原突变的碱基是由G:C→A:T的转换。这种鉴别常用于碱基类似物和亚硝酸等诱变剂诱发回复突变体的碱基转换。 4、何谓表型迟延？说明产生表型迟延的原因？ 表型迟延：突变基因的出现并不等于突变表型的出现，表型的改变落后于基因型改变的现象。 表型迟延有两种原因：分离性迟延和生理性迟延。 ①分离性迟延 经诱变处理后，细胞中的基因处于不纯的状态(野生型的基因和突变型的基因并存于同一细胞中)，突变型基因由于属于隐性基因而暂时得不到表达，需经过复制、分离，在细胞中处于纯的状态(一细胞中只有突变型基因，没有野生型基因)时，其性状才得以表达。