大豆苷元和人血清白蛋白的相互作用研究.pdfVIP

第29卷，第7期 光谱学与光谱分析 200 and 9年7月 SpectroscopySpectralAnalysis July，2009 大豆苷元与人血清白蛋白的相互作用研究 吴秋华，王东跃，周 欣，张志恒，刘伟华，王 志。 河北农业大学理学院，河北保定071001 摘要采用荧光猝灭光谱、同步荧光光谱和紫外一可见吸收光谱，研究了大豆苷元与人血清白蛋白(HSA) 之间的结合反应。大豆苷元对人血清白蛋白有较强的荧光猝灭作用，猝灭机制属于静态猝灭，并发生了分子 内非辐射能量转移。利用Stern-Volmer方程处理实验数据，得到大豆苷元与HSA之间的结合常数／G为 0．34×104(23℃)，1．10×104(30℃)和4．36×104 L·mol一1(40℃)。根据F6rster非辐射能量转移理论，求 出了大豆苷元与HSA之间的结合距离为1．50rim(23℃)，1．46rim(30℃)和1．42rim(40℃)。通过计算相 应的热力学参数，可知大豆苷元与人血清白蛋白的相瓦作用是一个吉布斯自由能降低的自发过程，且二者 之间的主要作用力类型为疏水作用力，同时用同步荧光光谱考察了大豆苷元对HSA构象的影响。 关键词大豆苷元；HsA；相互作用；荧光光谱 中图分类号：0641．3文献标识码：A 引 言 1实验部分 药物进入人体后，首先与血清白蛋白结合，然后通过运 1．1仪器与试剂 输和转运，才能产生药效或毒副作用，因此药物与血清白蛋 白相互作用的研究对于从分子水平上了解药物的作用机理、 毒理和代谢情况，从而对选择最佳用药量、用药周期以及多 种药物联用的最佳配比等具有重要指导意义。人血清白蛋白 是血液中主要的蛋白之一，担负着药物的贮存、运输等重要 试剂均为分析纯，实验用水为二次去离子水。以Tris-HCl缓 tool·L-1 作用，常常作为研究药物与蛋白质相互作用的模型蛋白[1{]。 冲溶液(pH7．4，含0．1 NaCI维持溶液的离子强 大豆异黄酮是大豆生长过程中形成的一类次生代谢产物，是 度)为溶剂配制成1．0×10-5 10-3 大豆中重要的功能活性成分之一，具有抗癌、抗肿瘤、降血 用。大豆苷元用乙醇配成2．0X tool·L-1的标准溶液备 脂、抗动脉粥样硬化、预防骨质疏松症、较强的抗氧化和抗 用。 真菌等生物活性，目前大豆异黄酮已经成为市售的重要保健 1．2实验方法 mL比 食品L6J。大豆苷元(Daidzein)是大豆异黄酮中的一种。本实准确移取一定量的大豆苷元乙醇标准溶液于10 验采用荧光光谱和紫外光谱研究了大豆苷元与人血清白蛋白 色管中，待乙醇挥发完全后，加入HSA标准溶液5mL，超 的相互作用机理，得出了大豆苷元与血清白蛋白之间的表观 声分散5min，一定温度下恒温2h后，激发和发射光栅狭缝 结合常数K一，结合位点数，z及结合距离r，根据热力学参数 均为5nnl，激发波长为283llln，恒温扫描在一定波长范围 确定了其相互作用力类型，并用同步荧光光谱研究了大豆苷 内HSA的荧光发射光谱、HSA在大豆苷元作用下的荧光猝 元对血清白蛋白构象的影响。这些研究为阐明药物在体内的 灭光谱、同步荧光光谱#以T矗s-Hcl缓冲溶液为溶剂配制 输送和代谢过程，了解药物分子在生物体中的作用机理提供 1．0×10_5 了实验数据和理论基础。