黏附细胞中生物大分子结构变化的显微Raman光谱.pdfVIP

( C 辑) 第32 卷 第2 期 SCIENCE IN CHINA ( Series C ) 2002 年4 月 黏附细胞中生物大分子结构变化的 显微Raman 光谱 * 李 光 杨红英 许以明 张志义 (中国科学院生物物理研究所, 北京 100101) 摘要 鉴于细胞黏附作用的重要生物学意义, 选择了T 淋巴细胞(Jurkat)为实验对象, 用先进的显微 Raman 光谱技术, 同时获得用其他方法难以得到的活细胞内数种生物大 分子的构象信息. 通过比较单个和黏附细胞的显微 Raman 光谱的差异发现, 当细胞黏 附时, 细胞内生物分子(DNA, 蛋白质, 碳水化合物, 脂类)的构象有不同的变化: ( ) 双 链DNA 的骨架保持有序的B 型或修改的B 型构象, 然而它的脱氧核糖和碱基(A, G, C, T) 的一些基团被修饰. ( ) 蛋白质构象的主 侧链变化明显不同, 属于 螺旋和折叠 的一些谱线强度下降而回折的一些谱线强度却明显增加; 酪氨酸和色氨酸从 埋藏状 态 变成 暴露状态 ; 它的巯基基团的谱线强度也有增加; 二硫键的构象从两种变 成 3 种, 表明细胞黏附引起该蛋白质主链的氢键体系和侧链环境的变化. ( ) 碳水化 合物的一些基团同时被修饰. ( ) 膜脂双层的构象变化很明显, 随着黏附细胞数目的 增加, 链间侧向相互作用序参数逐渐减少, 提示细胞黏附导致细胞膜的流动性和离子 通透性增加. 关键词 单个活细胞 黏附细胞 生物大分子 构象变化 显微Raman 光谱 细胞黏附对于许多生理过程非常重要, 诸如形态形成 免疫反应 伤口愈合和癌的转移 [1~3] [4,5] 等 , 黏附连接是通过连接在细胞骨架上的跨膜黏附蛋白形成的 , 这些连接结构保持和促 进同类细胞的黏附, 大量证据提示, 细胞黏附不仅能传递细胞之间的信号, 而且还能调节细胞 的生理活动[4, 6~8]. [9,10] [10] 细胞黏附作用对细胞功能影响的研究已经开始 . 例如, 庄侾僡等人 证实, 如果未分 化的肺芽上皮细胞与不同来源的间质细胞混合培养, 这些肺芽上皮细胞将发育成为不同的组 [9] 织, 而单独培养的肺芽上皮细胞却不能分化. Gurdon 等人 也证明仅当被诱导的中胚层细胞处 于聚团状态才能分化, 而单独培养的中胚层细胞却不能分化, 他称这种现象为“聚团效应”. 这 些结果表明, 细胞黏附可能影响甚至控制着胚胎细胞的分化. 在肿瘤转移过程中, 癌细胞总是 先入侵到血管壁并且进入到周围的组织中去, 然后这些肿瘤细胞黏附到正常的细胞上使之癌 [1] [ 1,11] 变 , 因此细胞黏附可能通过影响正常细胞间通讯诱导正常细胞发生癌变 . 对细胞黏附的过程和机制的研究已经十分广泛[5, 12~14]. 但是, 细胞内生物大分子(