基于微生物固定化的豆渣蛋白制备氨基酸营养液工艺及研究初探.pdfVIP

基于微生物固定化的豆渣蛋白制各氨基酸 营养液工艺研究初探 邹思远刘丹欧阳杰杜凯王平向洋2 (长沙理工大学，湖南长沙，410114) 摘要：本文报道了通过微生物将豆渣中残留蛋白质转化成氨基酸，充分发挥豆渣中富含蛋白质和粗 纤维及为传统安全食品的基础，为进一步探讨利用大豆纤维作为微生物固定化的基质材料，并通过 微生物固定化分解植物蛋白液，生产具生物学活性的氨基酸所进行的有益探讨。 本研究利用实验室筛选及诱变得到的高蛋白酶活力的微生物并通过采用生物工程的微生物固 体化技术的方法将植物蛋白液制成高氨基酸含量的营养液，菌种蛋白酶活分别为6830 O／g，氨基酸 态氮含量为0．712％，较原蛋白液中的氨基酸含量提高了约60倍，研究还发现豆渣含水量为50％、 pH值自然、温度在20C左右、接种量在10％左右时为最适的氨基酸制备工艺参数条件。 关键词：微生物固定化氨基酸豆渣生物工程 我国豆渣的产量巨大，每年产量大约在80万吨以上…，因其所含能量较低，而且口感粗糙，大 部分被人们用作饲料或干脆废弃，没有很好地开发利用，即造成资源浪费也污染环境。豆渣是大豆 加工过程的副产物，因此取材容易，价格低廉。根据研究表明，干的豆渣中含有18．0％～28．4％粗蛋 碳水化合物比’31，本文旨在利用最渣用作营养源和微牛物固定化的载体而实现氨基酸营养液的制备， 节能降耗、变废为宅和获得具有生物学的高氨基酸含量的营养液，合理利用资源，减少环境污染， 增加经济效益和社会效益。 1．试验材料与方法 1．1试验材料 豆渣：山湘阴食品J‘提供。 菌种：经实验室筛选及菌种诱变后得到的晓彩和晓∥邝百株菌株。 斜面培养基PDA：马铃薯2009，葡萄糖2g，琼脂209，蒸馏水l000mL，pH自然。 液体利一予培养基：马铃薯2009，葡萄糖209，蒸馏水l 000mL，pn自然。 固体发酵基础培养基：豆渣70％，麸皮30％，固水比为10：6，500mL__三角瓶装干料859。 1．2试验仪器 GB-82电热手提式压力蒸汽消毒器，京电子天平， Specturumlab22pc可 作台等。 1．3工艺流程 CL03、CL01菌种活化—◆转接于马铃薯培养基—◆制备孢子悬液 上 豆渣一称重一装瓶一灭菌一接种一菌种扩大培养 土 2通讯作者：向洋，长沙理工大学环境工程及生物技术研究所，主要从事生物工程技术方向； Email．-1860732 1000@qq．corn 129 蛋白酶活性测定 I 氨基酸态氮含量测定}一浓缩一过滤一蛋白质降解一微生物固定化 蛋白质含量测定 l 1．4最佳发酵工艺优化 每次取859豆渣进行发酵，在不同豆渣含水量、菌种接种量、培养基组成、培养温度和 培养时间等工艺条件下进行单因素实验，以发酵液氨基酸态氮含量作为衡量每次试验优劣的 标准。采用三因素三水平L。(33)正交试验方法，确定菌种发酵的最佳条件。 1．5营养液的制备及检测分析 将酵解液稀释过滤后调配装瓶，再灭菌后检验分析。用福林试剂法、考马斯亮蓝法和甲 X51 醛滴定法，分别测量菌种蛋白酶活力、蛋白质和氨基酸态氮含量；以ZB 002—89、GB2759- 8l和682760—86为标准，分析氨基酸营养液的理化和卫生指标。 2．结果与分析 2．1菌种的筛选 将原菌种(长沙理工大学向洋教授实验室分离筛选得到)分离、复壮，挑选最壮菌株进 酪蛋白培养基上，30℃，遮光培养24h，筛选出生长快，水解圈大的菌落进行试管和三角瓶培 养。用Folin试剂法测定其蛋白酶活