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猪传染性胃肠炎病毒检测技术研究进展 韩国全．郭万柱‘，李云云，李字．王小玉 (四川农业大学动物医学学院生物技术中心。四川 雅安625014) 摘要：猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)是引起猪病毒性腹泻的一种重要病原微生物，给世界养猪业造成巨大经济 损失。近年来．伴随着分子生物学技术的快速发展与应用．TGEV的检测技术取得了长足进展，积累了丰富的资 料。本文扼要阐述TGEV检测技术研究概况。 关键词：猪传染性胃肠炎病毒；疫苗；检测技术 TransmiSSible 猪传染性胃肠炎病毒(P0reine 流行性腹泻病毒混合感染32份，占29．2％叫。我实验室对四川、 virusof gastroenteritisswine，TGEV)归属于冠状病毒科冠 重庆、广西、广东、贵州等地规模化猪场送检的20份疑似样品检 状病毒属，是引起仔猪病毒性腹泻的重要病原【1I。由其引起的猪 测结果显示阳性率达55％，从某一角度说明当前我国规模化猪 传染性胃肠炎(transmissible ofswine，TGE) gastroenteritis 场TGEV流行依然比较严重131。 是一种急性、高度接触性传染病，以呕吐、严重水样腹泻、脱水 1 TGEV检测技术 和对2周龄以内仔猪的高度致死率为特征。不同年龄及品种的 临床实际操作中对TGEV的诊断比较困难，因为经常存在 猪对TGEV均易感染，虽然5周龄以上猪的死亡率很低，但这些 混合感染和细菌继发感染而使临床症状复杂化，根据流行病学 猪通常成为僵猪，饲料报酬低，给养殖业带来了巨大的经济损 和临床症状，只能作出初步诊断，特别是不能有效地将TGEV与 失。在1984年和1986年间，欧北美地区报道了一种特别的TGEV 自然缺失变异株一猪呼吸道冠状病毒(porcinerespiratory 别。确诊还需进行实验室诊断。目前主要有病毒的分离鉴定、病 coronavirus，PRCV)，给TGEV的防治带来了新的困难。临床 毒的电镜检测、病毒抗原的检测、病毒抗体的检测等传统的诊 资料显示早在1933年，美国依利诺斯州就关于TGEV的记载， 断方法。随着分子生物学的发展，一些基于病毒核酸的分子诊 但直到1945年Doyle和Hutchings才确定该病的病原为病毒，日 断方法，如RT—PCR、核酸杂交探针技术等相继建立并得到初 本1956和英国1957年先后报道TGE的发生与流行，自此之后欧 步应用。 美亚等多个国家相继报道发生了TGEV的传播流行，现已成为 1．1 病毒的分离鉴定 一种世界性病毒性传染疫病。我国从20世纪50年代起就有发生 病毒的分离鉴定是确认病原的最准确的方法，一般来说大 TGE流行的报道，1956年台湾省首次分离到TGEV，到目前为止 多数传染病的确诊都是依靠病原的分离鉴定。目前TGEV已获 我国大部分省市(自治区)都有该病的发生流行，近年来有流行 得在原代和次代猪肾细胞、猪肾传代细胞系、猪唾液腺原代细 加剧的趋势，给养猪业造成极大危害。尽管经常有TGE的暴发胞、猪甲状腺原代细胞以及猪源ST传代细胞上增殖并产生细 流行个案报道，但是关于TGEV流行病学资料较少见。于晓龙胞病变(CPE)，而这些细胞都已用来对TGEV的分离鉴定。初次 采用RT-PCR技术对采集于黑龙江省4个城市市郊猪场的113份 分离野毒株可能没有明显的细胞病变，需盲传几代才能出现明 疑似粪便样品进行检测，36份结果显示阳性，占31．9％，其