荷移荧光光谱法测定牛奶中苄青霉素残留.pdfVIP

第30卷第7期 分析试验室 VoL30．No．7 of 2011—7 ChineseJournal 2011年7月 Analysis Laboratory 荷移荧光光谱法测定牛奶中苄青霉素残留 徐兴志，张尹，杨亚玲‘，刘谋盛 (昆明理工大学生命科学与技术学院，昆明650224) 摘要：采用荧光光谱法研究了电子供体苄青霉素降解产物与电子受体四氯苯 醌(TCBQ)之间的荷移反应，结果表明TCBQ与苄青霉素的酸性降解产物在甲醇 一水介质中易发生荷移反应，生成稳定的络合物，其荧光强度较苄青霉素降解产 物本身有了显著的增强。据此建立一种测定苄青霉素的新方法，在最佳条件下， 苄青霉素浓度在O．30～8．0mg／L范围内与荧光强度呈良好的线性关系，检出限 为0．09mg／L。同时研究了荷移络合物的红外光谱，探讨了荷移反应的机理。 利用该方法对牛奶中苄青霉素含量进行了测定，并进行了加标回收试验，回收率 为88．O％～95．4％，相对标准偏差为1．3％一1．5％。 关键词：苄青霉素；四氯苯醌；荷移反应；荧光光谱 中图分类号：0657．3文献标识码：A 文章编号：1000一0720(2011)07-001-05 苄青霉素(Benzylpenieillin，PEN—G)又被称为 青霉素G、盘尼西林，能破坏细菌的细胞壁并在细 公司)；电热恒温水浴锅；Agilent双泵液相色谱仪： 菌细胞的繁殖期起杀菌作用的一种抗生素。以苄 mm×4．6 Agilent mm)；H一 青霉素为代表的B一内酰胺类抗生素，在奶牛养殖 TC—C18色谱柱(150 中常用于治疗奶牛的乳腺炎，尤其是苄青霉素，因 (PEN—G)储备液：1000 其廉价并具广谱抗菌性而被大量使用。目前，定量 mg／L，使用时逐级稀释至所 测定苄青霉素的方法主要是高效液相色谱法¨。J， 需浓度；四氯苯醌(TCBQ)(化学纯)；青霉胺；市售 荧光法Hj】、流动注射化学发光法【6J、毛细管电泳 牌高温灭菌袋装牛奶；酸化乙腈溶液：y(乙腈)： 法】、电化学免疫法哺1等。由于苄青霉素本身不 V(HCI)=6：4，其中c(HCI)为3．0mol／L。其余试 具有荧光吸收，且不含有伯胺等活性基团，所以很 剂均为分析纯，实验用水为二次蒸馏水。 难直接或间接进行荧光测定。本文在文献的基础 1．2实验方法 上一一2|，对苄青霉素进行酸性降解，通过HPLC谱 取苄青霉素溶液适量于10mL刻度具塞比色 mL0．1 图分析确定主要降解产物，利用其降解产物具有活 管中，加入l mol／L的HCI溶液，加水定容 性基团氨基与四氯苯醌发生荷移反应，其荧光发射 到2mL。摇匀后放置沸水浴中加热lh后，取出用 mL500 显著增强，据此建立起荧光光谱法测定牛奶中苄青 凉水冷却至室温，再加入2 mg／L四氯苯醌 霉素残留的含量。