马链球菌兽疫亚种类基因与猪链球菌基因片段的融合表达及仔猪免疫.pdfVIP

南京农业大学学报 　2003 , 26 (4) : 78～81 　 Journal of N anjin g A gricultural U niversity 马链球菌兽疫亚种类 M 基因和猪链球菌 2 型 mr p 基因片段的融合表达及仔猪免疫试验 1 1 2 范红结 , 陆承平 , 唐家琪 ( 1 南京农业大学农业部畜禽疫病诊断与免疫重点开放实验室 , 江苏 南京 210095 ; 2 南京军区军事医学研究所 , 江苏 南京 210002) β 摘要 : 将含猪链球菌 2 型 mrp 及马链球菌兽疫亚种类 M 基因融合片段的重组质粒转化大肠杆菌 BL 21 , 经异丙基硫代 D半乳糖苷 ( IPTG) 诱导 , 表达了相对分子质量为 60 000 左右的融合蛋白 。利用组氨酸亲和层析柱, 获得了纯化的融 - 1 μ 合蛋白 , 质量浓度为 4 2 g ·mL 。以纯化的融合蛋白、宿主菌 BL 21 经 IPTG 诱导表达后的超声波破碎上清、马链球 菌兽疫亚种 ATCC 35246 株和猪链球菌 2 型 HA 9801 株制备的二联灭活苗为免疫原 , 分别免疫 30 头仔猪 。初次免疫 1 月 后 , 以同样的剂量再次免疫, 3 周后以 5 ×LD50 的ATCC 35246 和 HA 9801 强毒株进行攻击 。结果, 纯化融合蛋白免疫组 的免疫保护率达 60 %, BL 21 上清免疫组的免疫保护率为 50 %, 全菌二联灭活菌苗的免疫保护率达 90 %。 关键词 : 猪链球菌 2 型; 马链球菌兽疫亚种; 融合蛋白; 免疫 中图分类号 : S85261 + 1 　　　文献标识码 : A 　　　文章编号 : 1000 2030 ( 2003) 04 0078 04 Fusion expression of Streptococcus equi subsp zooepidemicus Mlike gene fragment and S . suis type 2 mr p gene fragment and evaluation of its immune protection in piglets 1 1 2 FAN Hongjie , L U Chengping , TANG Jiaqi ( 1Key Laboratory of Animal Disease Diagnostic and Immunolog