水稻线粒体基因组和细胞质雄性不育研究进展DevelopmentofRiceMitochondrialGenomeandCytop.pdfVIP

遗传 HEREDITAS(Beijing)19(5):45一481997 水稻线粒体基因组与细胞质雄性不育研究进展 涂 裙 朱英国 武（汉大学生命科学院，武汉 430072) DevelopmentofRiceMitochondrialGenomeand CytoplasmMaleSterility TuJun ZhuYingguo (CollegeofLifeScience,WuhanUniversity,Wuhan430072) 高等植物细胞质雄性不育是一种普遍的生物学现象。表现雄性不育的植株一般不能产生或释放正常花粉．细 胞质雄性不育性状是通过细胞质遗传的，所以，人们认为细胞质雄性不育性是由线粒体或叶绿体的遗传物质所决 定的。进一步的研究表明，线粒体更有可能是决定细胞质雄性不育的重要因素。 近十多年来。飞速发展的分子生物学为植物细胞质遗传研究提供了许多新方法，如核酸限制性片段长度多态 性 以（下简称RFLP技术）、克隆和序列分析等方法。下面我们以水稻为材料，谈谈近年来对水稻线粒体基因组及 细胞质雄性不育机理的研究进展状况。 1线粒体基因组 高等植物线粒体基因组的结构相当复杂。线粒体基因组的大小因植物种类的不同，大约为 200kb到 21000kb、基本为单一顺序碱基。水稻线粒体基因组至少在 300kb以上 ‘通过电镜显示，植物线粒体DNA为一 个不同大小环状和线状分子的复杂集合体，而且限制性内切酶酶切片段量低于化学计量法所得总量，所以，推测 线粒体DNA是异质结构。 王斌等研究发现，电镜下水稻线粒体DNA为1至156kb的复杂集合体，主要为线状 少数为环状，部分表 现为超螺旋形态 他们通过酶切消化与电镜观察相结合，估算了水稻线粒体DNA的大小，与Kottaram的结果类 似 为300kb左右：’〕也有人认为，并不存在同样大小的单一主环结构、线粒体基因组以多个亚基因组环状分 子及线状分子存在，利用稀有切点限制酶构建了一个117kb的环状染色体图谱，并对COSI和atpA进行了精确 定位，粗略定位了rm26,Cob2,atp6,rtnl8基因2)〔。Yamato通过对细胞培养的A-58CMS水稻线粒体DNA物 理图谱的构建，发现培养中线粒体DNA发生了结构改变。据酶切分析结果推测，要么主基因组中有近 I00kb的 重复序列，要么线粒体基因组中井不存在主环分子，对认为线粒体基因组由单一主环构成的传统观念提出了 质疑 ”〔。Iwahashi等通过对线粒体基因组文库进行步行分析，构建了水稻的遗传图谱、提出线粒体基因组由5 个次环构成，每个次环都同其它一两个环共享一段同源顺序。主环的形成是由于次环通过其间的重复顺序进行同 源重组而得到的斗〔）。 杨金水等通过对IR36水稻线粒体基因组酶切条带杂交，发现水稻线粒体基因组中含有包括编码基因在内的 重复顺序r5),Nakazon。发现在水稻线粒体基因组中存在许多回文重复序列，在进化中一些回文重复序列可能 参与了插人重组事件，由于回文重复序列的存在，也增加了线粒体基因组的多型性(6) 卓德 良等对野败、红莲、BT型3种不同细胞质源的不育系和保持系的酶切图谱进行比较后发现，在不同细 46 遗 传 HEREDITAS(Beijing)1997 19卷 胞质中确实存在不同的线粒体DNA，且在不同保持系亦存在一定差异，这种差异表明线粒体DNA发生了变异 或重组，从而支持了水稻细胞质雄性不育的线粒体遗传的假设 ”〔，刘炎生等亦通过类似方法指出，可利用线粒 体DNA酶切带型对水稻细胞质雄性不育的细胞质源进行分类 s〔)，但Kadowaki发现即使细胞质来源相同的不 育系有时亦呈现mtDNA多态性，而不同来源的不育系亦可能有相同的酶切条带9)〔。这种不育系间的多态性给 研究线粒体DNA与细胞质雄性不育之间的关系带来了一定的困难，所以，必须对mtDNA差异进一步研究。 通过对线粒体DNA酶切片段进行分子杂交，人们发现在水稻细胞质雄性不育系和保持系的线粒体Cox工、 CoxU,Coxlii,atp6,atp9,atpA,Cob等基因中都存在位置或拷贝数的差异，刘炎生等发现在