烟草PVY+RealTime+PCR定量检测体系的建立与应用.pdfVIP

烟草PVY+RealTime+PCR定量检测体系的建立与应用.pdf

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中国烟草科学2010,31(1):9-12 9 Real—Time 烟草PVY PCR定量检测体系的建立及应用 刘晓霞1,一,杨金广1,王凤龙p,钱玉梅1,申莉莉1,张帅1,2王长栓3,黄瑾3 (1.国家烟草专卖局烟草病虫害监测与综合治理重点开放实验室,中国农业科学院烟草研究所,青岛266101:2.中国农业 科学院研究生院,北京100081:3.广西壮族自治区烟草公司百色市分公司,广西百色533000) 摘 要:马铃薯Y病毒是近年来危害烟草生产的重要病毒之一,严重影响烟草的产量与品质.本研究利用DNAMAN软件 virus 对GenBank数据库中已登录的马铃薯Y病毒(PotatoY,PvY)全基因组序列进行序列比对,设计引物,以烟草肌动蛋 白基因为内参,建立了烟草PVY的实时定量检测体系.获得的real.timePCR扩增基线平整,指数扩增明显,斜率大;稳定 有高效、灵敏、特异性强等优点,为从分子生物学水平上检测烟草中PvY提供了新的技术手段. 关键词:Real-timePCR;PvY;检测 中图分类号:$435.72 文章编号:1007.5119(2010)01.0009-04 Establishmentand ofReal—timePCRforDetection Application ofPotatoVirusYinTobacco LIU Xiaoxia他,YANG Yumeil,SHENLiftl, Jinguan91,WANGFenglongp,QIAN ZHANG Jill3 Shuai比.WANG Changshuan3,HUANG ofTobaccoPest Tobacco Research Laboratory MonitoringIntegratedManagement,StateMonopolyBureau,Tobacco (1.Key School Imtimte 266101,China;2.Graduate 100081,China;3.BaiseTobacco ofCAAS,Qingdao ofCAAS,Beijing Branch,Guangxi 533000,China) Corporation,Baise,Guan群i virus ofthe to in Abstract:Potato one most Vims鹤with tobaccoand recent Y(PVY)is important hllgedamage yieldsquality years. methodreal—timePCR onfluorescence Greenwas to PVYin A SYBR detect quantitativeusing techniquebasing dye employed tobaccointhis inGe

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