相衬显微镜.ppt

相衬显微镜原理及调试 一、原理 观察未经染色的标本和活细胞一类高度透明的样品，因样品的内部折射率不均匀或几何厚度不均匀，光波通过时波长和振幅不发生变化，只有相位会发生变化。 泽尼克发明的相衬法：通过空间滤波器（相位板）将物体的位相信息转换为相应的振幅信息，实现了将物的相位信息转化为像面上可观测的光强分布，从而大大提高透明物体的可分辨性。 环状光阑： 能使来自反光镜的直射光只能从环状部分通过，形成一个空心圆筒状的光柱，经聚光器并照射到标本以后，就产生两部分光，一部分是直射光，另一部分是经过标本后产生的衍射光，这两部分光经物镜内相板的作用而改变了光的相位和振幅。 相板：相板安装在物镜的后焦平面上。（1）相板上有一灰色的环状圈，称为共轭面，是通过直射光的部分。 （2）在共轭面的内，外侧部分称为补偿面，面上涂有减速物质，使衍射光的相位发生改变，是通过衍射光的部分。 这两者相结合就能分别改变直射光和衍射光的振幅和相位。 合轴调中望远镜： 环状光阑的环孔（亮环）与相差物镜相板的共轭面的环孔（暗环）调中和轴与调焦。 二、调试主要步骤： 1、转盘聚光器调换安装后，要进行合轴调中，使聚光器的光轴与显微镜的主光轴合一。 （1）缩小镜座上的视场光阑开孔，至最小。 （2）从目镜观察，在暗视场中可见一缩小的、明亮的、多角形的视场光阑图像。 （3）把视场中的明亮的多角形的视场光阑图像，调至视场中央。 （4）开放视场光阑至视场最大，视两者周边是否完全重合；否则，复用调中螺杆，使聚光器精神调中。 2、相板圆环与环状光阑圆环的合轴调中 (1)明环与暗环的聚焦 (2)明环与暗环的调中重叠