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间接红细胞凝集试验（IHA） 汉川市血吸虫病诊疗专科医院 用途 日本血吸虫病是由于日本血吸虫寄生于人和哺乳动物体内所引起的一种人兽共患寄生虫病。人体感染血吸虫病后，其血清中可产生相应的抗血吸虫抗体，该抗体在患者治愈后，仍可在体内存在较长时间。本产品的预期用途为检测人血清中日本血吸虫特异性抗体。用于血吸虫病流行区域人群血吸虫病的初筛。 原理 将日本血吸虫可溶性虫卵抗原（SEA）吸附于红细胞载体上，使其成为致敏红细胞。致敏红细胞与病人血清中抗体相遇时，在适宜的条件下，红细胞表面吸附的抗原与特异性抗体结合形成肉眼可见的红细胞凝集现象，即为阳性反应。 间接凝集反应的原理 试剂组成 冻干致敏红细胞（主要组成成分为SEA，人“0”型红细胞和蔗糖） 致敏红细胞稀释液（主要成分为PH 7.2磷酸盐缓冲液） 标本稀释液（生理盐水） 阴阳性对照 使用说明书 检验器材 加样枪及吸头（10-50UL1支，100-200UL1支） 水浴箱 PV板（96人份） 震荡器 记号笔 加样枪、吸嘴 水浴箱 PV板、记号笔 震荡器 操作方法5-1 配置致敏红细胞悬液：取冻干致敏红细胞1支，加入致敏红细胞稀释液1ML，充分混匀备用。 操作方法5-2 用加样枪加标本稀释液100UL于PV板第一排第一孔，第二三四排各加入25UL。 操作方法5-3 再向第1排第1孔加待测血清25UL，充分混匀后吸出25UL于第2孔，第2孔充分混匀后吸出25UL于第3孔，第3孔充分混匀后吸出25UL于第4孔，第4孔混匀后吸出25UL弃去， 操作方法5-4 第二至四孔血清稀释度分别为1：10 ， 1：20 ，1：40 。最后向第2至4孔每孔加入致敏红细胞悬液25UL，震摇1-2分钟后，置37度水浴箱水浴30分钟观察结果。 操作方法5-5 每次试验匀应设阴性，阳性对照。阴阳性对照血清为冻干品，使用前每管加100UL稀释液。充分溶液解后使用。 参考值 以血清稀释度1：10出现阳性反应作为阳性参考值，被测血清阳性反应稀释度≥1：10为阳性。 结果判断 阴性反应为红细胞全部沉入孔底，肉眼见一边缘光滑，致密的小圆点。 结果判断 阳性反应 ＋＋＋＋红细胞形成薄层凝集，边缘呈现不规则的皱褶。 ＋＋＋ 红细胞形成薄层凝集，充满整个孔底。 ＋＋ 红细胞形成薄层凝集，面积较＋＋＋者小。 ＋ 红细胞大部分沉集于孔底，形成一圆点，周围有少量凝集的红细胞，肉眼见周边模糊（或中间出现较为明显的空白点）。 注意事项 推荐使用加样枪加样，检测不同标本一定要更换吸嘴。使用定量吸管每人次一定要洗净，避免相互污染。 待检血清或血浆不能混有红细胞或被细菌污染。样本若不能及时检测可在2-8度保存2-3天，长时间保存应放零下20度冰箱冻存。 结果判断的时间与温度有关，在20-30度条件下，建议30-60分钟判断结果。 试剂盒每次取出后先平衡至室温后使用。 试验所用的一次性血凝板应头天用蒸馏水冲洗干净，晾干备用。 * * 间接红细胞凝集试验（indirect haemagglutination test，IHA）：粪检血吸虫虫卵阳性者与IHA阳性符合率为92.3%～100%，正常人假阳性率在2％左右，与肺吸虫、华支睾吸虫、旋毛虫感染者可出现假阳性反应。IHA操作简便，用血量少，判读结果快，目前国内已广泛应用。 *