不同能量底物对猪卵母细胞成熟效果影响.pdfVIP

中困畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十六届学术研讨会论文集 不同能量底物对猪卵母细胞成熟效果的影响 刘帅1，崔奎青‘，沈开元，刘庆友，石德顺‘ (广西大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室南宁530004) 引言 建立稳定可靠的卵母细胞成熟体系对动物体外胚胎生产具有重要意义n3。卵母细胞成熟 是～个复杂的过程，其中能量物质代谢对卵母细胞成熟发挥着关键作用比1。本研究目的是探 讨不同能量底物组合及不同成熟基础液对猪卵母细胞成熟及后期胚胎发育的影响。 材料与方法 配制含有不同能量底物(葡萄糖、丙酮酸钠、谷氨酰胺、葡萄糖+丙酮酸钠、葡萄糖+丙 猪卵母细胞成熟培养，鉴定卵母细胞成熟率及死亡率。并对成熟后的卯母细胞进行激活，统 计早期胚胎发育潜能及囊胚细胞数。 结果 以TCM．199为成熟基础液，单独加入某一种能量底物或两者结合加入对猪卵母细胞死亡 率影响不显著，但同时加入三种能量底物，死亡率显著降低(O．8％VS6．4％，PO．01)，去除能 量底物死亡率显著升高(9．7％VS 0．8％，P0．01)。单加入谷氨酰胺，极体率显著低于其它组； 48．3％和29．9％VS 无外援能量底物组极体率及囊胚率都显著高于其它组(88．1％VS 15．8％， PO．05)。不同能量底物组合加入对猪孤雌后囊胚细胞数影响不显著。TCM．199为成熟基础 液组的极体率及囊胚率都显著高于NCSU．23组，但死亡率及囊胚细胞数差异不显著。 讨论 卵母细胞成熟过程中，卵母细胞主要以丙酮酸作为能量底物，而对于葡萄糖的利用则是 在卵丘颗粒细胞内，首先经过糖酵解途径分解为丙酮酸或乳酸，才可被卵母细胞进一步利用 [31。谷氨酰胺主要作为抗氧化剂GSH的前体物及多种氨基酸合成的中间产物起作用，但也有 报道其可通过氨基酸代谢而替代能量物质。本文研究证明葡萄糖、丙酮酸钠和谷氨酰胺都可 作为卵母细胞的能量底物，但低能量底物情况下会造成卵母细胞的早期凋亡14J，这与卵母细 胞抗ROS作用减弱有着直接联系。并且低能量底物时可能使一些趋于凋亡的卵母细胞提前凋 亡，从而使成熟及胚胎发育率显著提高。另外，单独以谷氨酰胺作为能量物质，会造成卵母 细胞成熟及后期胚胎发育潜能下降，这主要是由于谷氮酰胺利用需要先经过糖异生作用，这 本身就是一个耗能过程，而其对Ni-h的需求也会破坏胞内氮平衡，另外谷氨酰胺的消耗也会 TCM．199中多种氨基酸加入有关。 参考文献 1．YuanYandRLKrisher．InVitro Mol Oocytes．MethodsBiol，2012． Maturation(IVIVI)ofPorcine 825：l83．98． 2．Herrick M of metabolismin J凡ABrad，andRLKrisher．Chemical manipulationglucose onnuclear maturationin 3 and l(2)： porcineoocytes：effects cytoplasmic vitro．Reproduction，2006．1 289．98． 3．Li D inMouseCumulusCellsPrevents Q，MiaoQ，Zhou只eta1．GlucoseMetabolism Oocyte theIntracellular