胡萝卜组织培养程序.ppt

胡萝卜组织培养程序 制作人：唐少 薛钰一、材料处理 把胡萝卜切成约4cm的段； 去除表皮； 靠外层切成约4x1x1cm的条，里面木质部和髓不要。 二、消毒和清洗 把切好的材料，放在100ml的烧杯里，加入75％酒精，浸泡30秒； 把酒精倒入废液瓶里，然后加入0.2％升汞，浸泡25－30分钟； 把带有升汞的烧杯拿到超净工作台，取出材料，放入培养皿，用灭菌水洗4－5分钟，重复3次。 三、接种 把洗净的材料用烧过的镊子夹到盛有滤纸的培养皿里，去除表面一层，然后切成约7x5x5mm的块； 把切好的材料，用烧过的镊子夹到锥形瓶里，3－5块/瓶。 注意事项： 防火。实验中要经常用酒精消毒、用酒精灯烧镊子、刀具，注意安全。 无菌操作。材料经升汞消毒后，即认为是消毒干净，此后的操作中的用具要求无菌。为防止染菌，注意：手要用酒精擦干净；镊子和刀经常在火焰上烧；锥形瓶、手不要放在盛材料的培养皿上方。 废液处理。酒精要回收，放原处；升汞有剧毒，小心不要溅出，废液倒回原处。 常见错误举例 托盘端到超净工作台里。 材料切得过小。 材料消毒时间过长。 切材料时下面没垫滤纸。 镊子、刀在酒精灯上烧过立即放到盛酒精的烧杯里。 操作时，手、三角烧瓶在盛材料的培养皿上方活动，容易把菌带到材料上。 把接种的切块压入培养基里面。 接种时瓶口垂直向上，手、镊子上的赃物容易掉到瓶里。 升汞回收倒入酒精桶里。 * * *