山东省禽源致病性大肠杆菌质粒介导喹诺酮类药物耐药基因的检测.pdfVIP

山东 农 业 科 学 2012，44(9)：5—8 ShandongAgriculturalSciences 山东省禽源致病性大肠杆菌质粒 介导喹诺酮类药物耐药基因的检测 苏 晶 ，杨芳芳 ，孙 慧 ，朱岩丽 ，王淑静 ，谢之景 ，毕海洋 ，姜世金 (1．山东农业大学动物医学院／山东省动物生物工程与疾病防治重点实验室，山东 泰安 271018； 2．淄博市博山区畜牧局，山东 淄博 255200) 摘 要：为了解山东省禽源致病性大肠杆菌质粒介导喹诺酮类药物耐药基因分布情况，对2004—2011年 间分离的230株禽源致病性大肠杆菌进行了qnrA、qnrB、qnrS基因的PCR检测 ，结果发现未检出qnrA和qnrB， qnrS基因的检出率为25．22％ (58／230)。对部分检出的qnrS基因测序后发现假阳性率较高 (8／24)，为了提 高检测的特异性 ，建立了检测qnrS基因的套式PCR，测序结果表明该方法检出准确率为 100％，使用该方法检 出230株细菌中qnrS基因的携带率为 16．52％ (38／230)，表明含 qnrS基因的耐药质粒在山东省禽源致病性 大肠杆菌中分布较为广泛。 关键词：大肠杆菌；喹诺酮类药物；耐药性；qnrS基因；套式 PCR 中图分类号：Q781 文献标识号 ：A 文章编号：1001—4942(2012)09—0005—40 DetectionofQuinoloneResistanceGenesinPlasmidamong AvianEscherichiacoliStrainsfrom ShandongProvince SUJing，YANGFang—fang，SUNHui，ZHUYan—li，WANGShu—jing， XIEZhi—jing，BIHai—yang，JIANGShi—jin (1．CollegeofVeterinaryMedicine，ShandongAgriculturalUniversity／ShandongKeyLaboratoryofAnimalBioteehnology andDiseaseControlandPrevention，Taian271018，China；2．BoshanAnimalHusbandryBureau，Zibo255200，China) Abstract InordertostudytheprevalentofresistancegenesinplasmidtoquinoloneamongavianEsche- richia colistrainsfrom ShandongProvince，atotalof230strainsisolatedin2004～2011weretestedbyPCR to examinetheqnrA，qnrB andqnrSgeneswhichmediatedquinoloneresistance．Theresultsindicatedthatthe presentratioofqnrA，qnrBandqnrSgeneswere0，0and25．22％ (58／230)，andtherewashighfalseposi— tiverateindetectionofqnrSgene(8／24)bysequencingsomePCRpositivesamples．Inordertoimprovethe detection specificityofqnrSgene，anested—PCR methodwasestablishedandusedtodetectthe230E．coli strains．Thesequencingresultsindicatedthattheaccuracyofthemethodwas100％ ，andthepresentratioof qnrSgenewas16．52％ (38／230)，whichshowedthattheplasmidwithquinoloneresistancegeneqnrSwas morewidelydistributedinavianEscherichiacolistrainsrfom Shan