实验五醋酸纤维薄膜电泳法分离牛血清蛋白.docVIP

姓名：郭沈杰 年级专业：2012级生物科学 同组者：蔡萍萍 学号：12050011012 实验五 醋酸纤维薄膜电泳法分离牛血清蛋白 一、实验目的 掌握醋酸纤维薄膜电泳法分离蛋白质的原理和方法。 二、实验原理 蛋白质是两性电解质。当PHPI时，蛋白质为负离子，在电场中向阳极移动；当PHPI时，蛋白质为正离子，在电场中向阴极移动。血清中含有数种蛋白质，它们所具有的可解离集团不同，在同一PH值时，因所带电荷不同，而在电场中的移动速度也不相同，故可用电泳法将其分离。 本试验以牛血清为材料，醋酸纤维薄膜为支持物，通过点样、电泳、染色、脱色从而得到血清中蛋白质的分离图谱，再进行观察和定量分析。 血清中含白蛋白、α-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白等。其等电点低于pH7.0，在缓冲液中（pH8.6）中，电离成负离子，在电场中向阳极移动。 三、实验仪器 1、? 牛血清 2、? 醋酸纤维薄膜 3、? 镊子 4、? 电泳仪 5、? 电泳槽 6、? 盖玻片 四、实验试剂 1、巴比妥—巴比妥钠缓冲液（离子强度，PH8.6）：称取巴比妥1.66g和巴比妥钠12.76g，溶于蒸馏水并稀释至1000ml。用pH计较正后使用。 2、?染色液：氨基黑10B0.5g,甲醇50ml，冰乙酸10ml，蒸馏水40ml混匀即可。 3、?漂洗液：95%乙醇45ml，冰乙酸5ml和蒸馏水50ml