脲变性α-糜蛋白酶的高效液相色谱复性.pdfVIP

维普资讯 新乡医学院学报 JournalofXinxiangMedicalCollege Vo1．25 No．4 July 2008 ·363 · 脲变性 糜蛋白酶的高效液相色谱复性 刘振岭 ，柯从玉 ，耿信笃 (1．新乡医学院化学教研室，河南 新乡 453003；2．西北大学现代分离科学研究所，陕西 西安 710069) 摘要 ： 目的 研究变性蛋白质在高效疏水作用色谱 (HPHIC)固定相表面上的保留行为及活性回收率。方法 用 脲将标准蛋白质 ．糜蛋白酶(．Chy)变性，然后以硫酸铵为流动相，用 HPHIC固定相 (TSK)对脲变性 —Chy进行复性 ， 并测定复性 —Chy的z值 、质量及活性回收率。结果 z值随脲浓度的增大而减小，变性剂浓度在 1．0—3．0otol·L 范围内时，HPHIC对变性 ．Chy有较高的活性回收率。结论 HPHIC是变性蛋 白复性的有效工具，蛋白质与固定相之 间的疏水作用是蛋白折叠的主要驱动力。 关键词：高效疏水作用色谱 ；脲；一糜蛋白酶 ；蛋白复性 中图分类号：Q511 文献