UVB与钙离子对体外培养人角质形成细胞表达天疱疮抗原的影响.pdfVIP

维普资讯 nJDe 449 · 论 著 · UVB与钙离子对体外培养人角质形成细胞 表达天疱疮抗原的影响 渠涛 王宝玺 邵燕玲 曾建英 【摘要】 目的 研究中波紫外线 (UVB)照射以及不同钙离子浓度对角质形成细胞表达天疱疮抗原 的影响=方法 通过改变培养基中的钙离子浓度 以及采用不同剂量 UVB照射体外培养 的人角质形成细 胞，在不同时间段 以寻常型天疱疮 (PV)或落叶型天疱疮 (PF)血清作为一抗进行免疫荧光检测，观察寻常 型天疱疮抗原 (PVA)和落叶型天疱疮抗原 (PFA)的表达情况 ；提取细胞或皮肤表皮组织蛋白质 ，用PV和 PF血清进行免疫印迹检测。结果 无论是否增加钙离子浓度 ，体外培养人角质形成细胞间隙均可以检测 到Pv血清特异性着色。只有增加培养基中钙离子浓度后 ，形成的复层化角质形成细胞间隙才可以检测 到PF血清特异性荧光着色。不同剂量 UVB照射后的角质形成细胞均不产生PF血清的特异性着色。PF 血清与 160000条带反应，PV血清可与 130000和 160000两条带反应。结论 体外培养的单层或复层 角质形成细胞均可以表达 PVA，提高培养基中钙离子浓度可以诱导培养人角质形成细胞复层化并表达 PFA，而UVB照射不能促使人角质形成细胞在体外培养条件下表达 PFA。 【关键词】 角蛋 白细胞 ；天疱疮 ；钙 ；紫外线 EffectsofUVB IrradiationandCalcium ontheExpressionofPemphigusAntigensbyHumanKeratinoeytes QuTao,WANGBaoxi，SHAOYanling,ZENGfianying．DepartmentofDermatology，PekingUnnMedialCol- legeHospital，PekingUnionMedwalCollege,ChineseAcademyofMedwalSciences,Be ng100730，China IAbstract】 Objective ToinvestigatetheeffectsofUVB adiationandcalciumatdifierentconcentrations ontheexpressionofpemphigusantigensbyculturedhumankeratinocytes．M ethods Humankeratinocytecultures weretreatedwith either2 mmol／L calcium added to theserum．freemedia,orexposure toUVB irradiation．Im- munofluoreseeneestainingwasperformedwithserafrompatientswithpemphigusvulgaris (PV)orpemphigusofli— aceusfPF)asthefirstantige~ Extractsfrombothepidemr isandkeratinocyteswererunonSDS—PAGEaccordingto lmemmliSmethodandtransferredtonitrocellulosemembraneforimmunoblotwithPV andPF sera~ Results Spe eifiestainingwithPV serawasalwaysdetectableonkeratinocyteculturebyimmunonuorescenceassaywithorwithout highconcentrationsofcalcium whilePF antigenwasdetectedonstratifiedcellsonly．However,exposuretoUVB irradiationcouldnotevokekeratinocyteculture