不同光照下褪黑素变化对鸡骨髓内c-fos原癌基因表达的影响.pdfVIP

·186· 经验交流 中国畜牧兽医 2009年第36卷第9期 不同光照下褪黑素变化对鸡骨髓内c—fos 原癌基因表达的影响 宋丽霞。刘淑英 (内蒙古农业大学动物科学与医学学院，呼和浩特010018) 摘要：为了找出褪黑素分泌变化与c-fos原癌基因表达之间的关系，本研究控制不同光照时间饲养1日龄雏鸡50只，取骨 髓组织，经免疫组化试验，结果显示：①单核细胞系胞浆出现阳性信号；巨核细胞系、粒细胞系和淋巴细胞系胞核出现阳性信 号；红细胞系无阳性信号；②随着光照时间的延长，c-fos原癌基因的表达量呈增长趋势。结果表明，c-los与骨髓细胞的细胞增 殖和分化相关。褪黑素的增高能够显著抑制c-los原癌基因的表达，且褪黑素的减少能够刺激c-los的表达。 关键词：褪黑素；e-fos原癌基因；骨髓 中图分类号：s852 文献标识码：A 文章编号：1671-7236(2009)09-0186—03 1．2．2免疫组化方法骨髓组织经固定脱水后石 褪黑素(melatonin，MT)是新近引起人们广泛 注意的天然抗肿瘤药物，对多种恶性或良性肿瘤具 蜡包埋，切片厚度为4pm，60℃烤片2h后经脱蜡、 min。 有明显抑制作用(梅琦，1995)。其抗肿瘤机制可能水化，滴加3％H。O。(80％甲醇)室温静置10 与直接抑制肿瘤增殖、免疫增强作用及抗氧化作用 128℃高压修复1min，滴加正常血清封闭液，室温 10min。甩去多余液体后直接滴加I抗(37℃孵育 有关(Satomura等，2007；Moore等，2002；Tomas- 1 Zapico等，2005)。MT毒副作用相对小，且可减少h)，PBS洗3次，每次5min。滴加Ⅱ抗(37℃孵 min，DAB显色，在 其他抗肿瘤药的毒性(Akagi等，2004；Lissoni等，育30min)，PBS洗3次，每次5 2003)，已成为研究的热点之一。c-fos是原癌基因显微镜下掌握染色程度。苏木精复染脱水、透明、封 家族中的一员，它的蛋白质产物参与正常细胞的生 片、镜检。 长、分化和增殖，但是当c—fos过量表达或出现突变 1．2．3结果统计在镜下观察Pfos基因在骨髓 时，就会导致细胞大量增生，出现癌变。笔者通过控 细胞内的表达位置。在镜下随机选择10个视野，分 制光照的方法改变鸡体内褪黑素的分泌水平，研究 别算出阳性率(阳性细胞数／总细胞数)，取各组的平 褪黑素分泌的变化与c-f05基因表达之间的关系。 均值用SPSS软件的LSD法进行分析数据处理。 1材料与方法 2结果 2．1免疫组化结果 1．1材料c—fos兔抗人多克隆抗体，购自LabVi— 骨髓细胞中的棕黄色显色为 sion公司。SP两步法试剂盒、DAB显色液，购自天阳性信号。图1空白对照片没有棕黄色的阳性显 津津脉公司。1日龄鸡50只。 色。图2阳性反应片有分散的棕黄色显色的阳性反 1．2 方法 应。图3为粒细胞。图4为单核细胞，从图中可以 1．2．1分组控制光照 1日龄鸡适应性喂养1周 看出棕黄色显色在单核细胞的胞浆，胞核呈蓝色，未 后分为6h短光照组、12h对照光照组和18h长光 被染色。图4中箭头2所指为红细胞，可以看出红 照组进行喂养。用照度计测得动物饲养室内自