利用SSR分子标记构建玉米自交系指纹图谱.pdfVIP

利用SSR 分子标记构建玉米自交系的指纹图谱 李丽华 魏昕 潘光堂* ( 四川农业大学玉米研究所，四川雅安625014) E-mail ：llhtg1997@163.com 。 *E-mail：pangt@ 摘要 本实验利用80 对SSR 引物对20 个玉米自交系进行扩增，综合考虑扩增带的清 晰程度及多态性、条带多少、引物重复性高低，筛选出Phi080，Phi123，Umc1061，Phi126， Phi065，Dupssr13，Phi102228，bnlg240，Phi083，Phi024 等10对引物，构建了20 个玉 米自交系的指纹图谱。其中有7 个材料各用1 对引物就可确定其特征性谱带，有3 个材料 各需用2 对引物组合就能区分，有2 个材料需4 对引物组合方能予以有效区分，其余材料 则需8 对引物组合才可区分。本实验还对这 10 对引物的重复性作了验证，再次证明利用 SSR 标记构建玉米自交系指纹图谱是可行的，也是可靠的。 关键词 玉米 自交系 SSR DNA 指纹图谱 DNA 分子标记技术本质上指能反映生物个体或种群间基因组中某种差异的特异性 [1] [2] DNA 片段 。简单序列重复SSR 分子标记又称微卫星 ，是由1-4 个碱基组成的重复序列， 在真核生物基因组中普遍存在，表现为共显性标记。SSR 标记已经成为研究种质资源遗传 [3,4] 多样性，基因作图，亲子鉴定的首选标记 。 近代指纹分 的概念结合生物技术的发展，延伸到了DNA 指纹图谱分 ,而且应用范 [5] 围也从犯罪学扩大到医学和其他生命科学领域 。DMA 分子标记大多以电泳谱带的形式表 [6] 现生物个体之间DNA 差异,通常也称为DNA 的指纹图谱 。 [7] 近年来，一些学者在玉米指纹图谱的利用方面做了大量研究工作。谭君等（2003 ） 对 西南地区在生产上正在使用的73 份玉米自交系构建了SSR 指纹图谱表明利用SSR 技术进 [8,9] 行玉米自交系鉴定是可行、有效的。赵久然等（2003 ） 利用 SSR 分子标记对中国玉米 新品种DNA 指纹库建立进行了一系列系统研究，他们对SSR 技术进行了优化，最终建立 一套完善的适用于玉米品种鉴定的SSR 标准体系。 DNA 指纹图谱技术可以对植物基因 做出明确的鉴定，特别是对那些没有准确系谱记 载的育种材料进行遗传分类，弥补系谱记载的缺失；育种家可以采用这项技术鉴定自交系 [10] 的遗传特征，保护这些自交系的品种权免受侵犯 。因此，研究玉米自交系的指纹图谱 具有重要意义。 本项目得到 “北京农业育种基础研究创新平台，北京市自然科学基金项目 中国玉米标准DNA 指纹库构 建及关键技术研究’课题”和 “四川省生物技术攻关项目”的资助。 - 1 - 本研究利用SSR 分子标记技术，目的是构建四川农业大学玉米研究所近年选育的优良 自交系的指纹图谱，以期找出其特征谱带，更有效地保护它们的知识产权。 1 材料与方法 1.1 供试材料 表1 列出四川农业大学玉米研究