HPLC分离和测定香梨三种植物激素.pdfVIP

新 疆 农 业 大 学 学 报 　2000 ,23 ( 1) :54～56 J ournal of Xinjian g Agricultural Universit y ( ) 文章编号 2000 HPL C 分离和测定香梨三种植物激素 郑春霞 , 王 强 , 阮 晓 (新疆农业大学环境系 ,乌鲁木齐 830052) 摘　要 　本研究探索用高效液相色谱法 ,测定吲哚3乙酸、脱落酸、赤霉素三种植物激素的条 件 ,建立了从植物果实中提取三种激素的方法。 关键词 　香梨 　高效液相色谱 中图分类号 　S6617601 　　　　　　文献标识码 : 　A 香梨采前、采后、贮藏及衰老等生命活动 ,是受植物体内的内源激素所调节的 ,因此搞清 植物内源激素的变化规律 ,对香梨采后生理的研究非常重要。植物激素在植物体内含量甚 微 ,而且存在着大量的干扰测定的物质 ,给提取、分离和定量分析带来一定困难 〔1〕。我们采 ( ) ( ) ( ) 用反相液相色谱法 ,对香梨中吲哚3乙酸 IAA 、脱落酸 ABA 、赤霉素 GA 三种植物激素 同时进行分离和测定 ,具有较高的灵敏度和选择性 〔2 ,3 〕。 1 　仪器与方法 ( ) ( ) LC6A 高效液相色谱系统 日本岛津 ; UV250 型紫外可见分光光度计 日本岛津 。 GA ,IAA ,ABA 标样均为 FL URA 产品 ,CH CN ,CF COOH 均为色谱纯 ,水为超纯水。 3 3 准确称取香梨果肉 2 g ,加入 10 ml 0. 5 mol ·L - 1NaOH 溶液 ,离心 10 min 后 ,取上清液 , 并在等体积的乙酸乙酯下萃取三次 ,每次离心 10 min ,且中间水相 ,用 1 mol ·L - 1 HCl 调至 〔4 〕 μ p H = 2 。合并酯相 ,减压蒸馏 ,定容至 50 ml ,并取 10 l 样品入 HPLC 分析 。 2 　结果与讨论 2. 1 　检测条件选择 2. 1. 1 　色谱条件 流动相 A 液为 CH CN ∶H O ( 1 ∶9 V/ V) 混合液 ,其中内含 0. 2 % CF COOH ,p H = 3 。流 3 2 3 动相 B 液为 CH CN ∶H O (6 ∶4 V/ V) 混合液。流速 1. 5 ml ·min - 1 ,泵压 1. 92 MPa 。检测波 3 2 长 250 nm ,分析样品采用二元梯度参数。 采取流速为 1 ml ·min - 1 ,泵压 1. 28 MPa ,按二元梯度参数 ,只能分离测试单独的某种激 素, 不能同时分离出三种激素。经过反复试验 , 我们将二元梯度加大 , 由原来的2 0 min 收稿日期 :1999 - 06 - 23 第 1 期 　　　　　　　　　　郑春霞等 : HPLC 分离和测定香梨三种植物激素 　　　　　　　　　　 55 B. CONC 45 % ,改为 14 min 时 ,就将 B