啤酒废酵母核糖核酸提取过程中去除蛋白质的研究.pdfVIP

维普资讯 研究报告 中 国 酿 造 2006年第3期 总第 156期 ·27 · 啤酒废酵母核糖核酸提取过程中去除蛋白质的研究 王晓丽，郑飞云 李 崎，顾国贤 (江南大学工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 214036) 摘 要：讨论了3种去除核糖核酸 (RNA)中蛋白质的方法，通过对蛋白质去除效果及影响RNA损失情况的分析比较，发现 ~,J]lJ40Ug／绝干酵母中性蚩白酶降解蛋白质的方法为最好，这种方法制得RNA粗品，得率达到5 ． 75％，蛋 白质去除T96．6％。 关 键 词：啤洒废酵母；蛋白质：RNA；提取 中图分类号：TQ926．4 文献标识码：B 文章编号：0254—5071 (2006)03—0027—04 RemovalofproteininRNA extractionofwastebrewingyeast WANGXiao-li，ZHENGFei—yun，LIQi，GUGuo—xian fTheKeyLaboratoryofIndustrialBioteclmology,MinistryofEducation,Sou~emYangtzeUniversiO~,Wuxi214036,China) Abstract：Threeme~odsofremovingproteinsinRNA werediscussedinthispaper ． Thebestwaywastoadd40U neutralproteasepergram dryyeast，andot comparetheeffectsofproteinremovaltohtelossofRNA．TheextractionyieldofthiscrudeRNAproductwas5． 75％ while hteremovalratioofproteinwas96+6％． Keywords：wastebeeryeast；protein；RNA；exrtaction 啤酒酵母属真菌，是单细胞微生物，细胞呈圆形 啤酒废酵母：重庆啤酒集团常州天 目湖啤洒公司。 或椭圆形，直径 5cm～10cm，它由细胞壁、细胞质、 RNA (酵母)：中国医药 (集团)上海化学试 细胞核、细胞膜、细胞液等构成。啤酒酵母的细胞含 剂公司。 水量 75％~80％，干酵母的主要成分是蛋 白质、核酸、 碳酸氢钠、盐酸 、氧化铜(粉末)、地农酚 (3，5． B族维生素和矿物质元素等成分。其中蛋白质 占50％ 二羟基甲苯 )、无水乙醇、硫酸铵：均匀分析纯。 左右 ，RNA 占3％胡％[1]。传统提取啤酒废酵母 中 1．2分析方法 R_NA的方法大多采用浓盐法和稀碱法，而采用这些方 水分测定：烘干法圜；蛋 白质测定：微量凯氏定 法得到的R_NA中仍然存在很多的蛋白质，导致R_NA 氮法3[]：RNA测定：地衣酚一Cu2法4[1。 纯度不高，而且RNA得率也很低，目前国内RNA的 1．3方法 得率仅为3％ ％。奉文主要讨论了玄除RNA中残留 1．3．1啤酒废酵母预处理方法5]『 蛋白质的方法，从而提高RNA的提取得率和纯度。 啤酒废酵母一酵母悬液一过 80目筛2次一 1材料与方法