喜钙念珠藻无机碳利用机制初步研究.pdfVIP

喜钙念珠藻无机碳利用机制初步研究 1 2 李忠义 ，刘立峰 (1. 聊城大学生命科学学院，山东 聊城 252059；2. 山东曹县郑庄乡苏道口学校，山东 菏泽 274400 ) 摘要：为了探讨喜钙念珠藻（Nosioc calcicola Breb.）在岩溶水中进行光合作用时的无机碳 源，作者利用pH漂移技术对喜钙念珠藻进行了深入研究。结果表明：在不同材料用量和不同光 照强度下，尽管喜钙念珠藻的pH变化速率发生发现，但其pH补偿点不受上述因素的影响。这是 因为其pH补偿点的高低主要受其自身生理机制控制，即是否能够利用岩溶水体中的HCO3- 作为 碳源进行光合作用有关。 关键词：pH 漂移技术; 无机碳; pH 补偿点 中图分类号：Q94 文献标识码：A 1 引言 pH漂移技术是建立在藻类密闭光照培养和水化学分析基础上的一种简便、灵敏的研究方 法，也是目前较为普遍采用研究无机碳素利用能力和机制的方法。该技术是利用密闭培养系统 在一定碱度水体及适宜光、温等条件下对藻类连续照光，通过水体无机碳变化探讨藻类无机碳 利用机制。Spence.采用该方法对五十种淡水植物进行研究，发现有近半数能够利用HCO3- [1]。 Maberly.利用该法对 35 种大型海藻进行调查，发现只有六种红藻不能利用HCO3-进行光合作用 [2] 。 因而，通过分析密闭培养体系分析喜钙念珠藻光照前后的水体的pH变化、无机碳浓度变化， 不但可以比较不同藻类的无机碳利用能力，而且还能间接证明喜钙念珠藻是否存在胞外碳酸酐 - + [3] 酶催化 HCO +H ⇔CO +H O反应，使CO 进入细胞体内进行光合作用 。 3 2 2 2 2 材料与方法 2.1 材料 - 本研究所选用的喜钙念珠藻Nosioc calcicola Breb.取自云南白水台富含HCO 的泉水中， 3 采用吸管法进行藻类的分离和纯培养，最后对分离出的喜钙念珠藻Nosioc calcicola Breb.进 行无菌检查，即取 1 ml洗过的藻细胞加入肉汤培养液中(葡萄糖 10 g、牛肉膏 3 g 、蛋白胨 5 g、 NaCl 15 g 、水 1000 ml、pH 6.8)37 ℃下培养 24 h ，若液体变混浊即表明该藻样中仍含有细菌， 仍需要进一步纯化[4]。 在密闭培养前，用富含HCO3- 的岩溶水反复冲洗喜钙念珠藻Nosioc calcicola Breb.，然 后置入 250 ml 25 ℃消毒岩溶水中进行不同材料用量和不同光照强度的密闭培养，每两个小时 测一次碱度，每 15 分钟测一次pH值。 2.2 水的碱度和无机碳的测定 碱度(Alkalinity)是岩溶水中弱酸阴离子总含量的度量。岩溶水体中含有相当数量的HCO3- 、 2- - + CO3 、OH 等阴离子，它们都是H 的接受体，并将这些氢离子受体的总和称为碱度，常用“ALK ” 表示碱度的测量采用盐酸滴定法[5]。 由于岩溶水中的[OH- + ]和[H ]含量极低，可以忽略不计，通常碱度表示为： - 2- ALK= [HCO3 ]+2[CO3 ] 水体pH用WTW Multlin