人TCP11L2和鼠Tcp1112基因的定位及表达的初步研究.pdfVIP

维普资讯 四川医学 2008年 6月第 29卷 (第 6期) SichuanMedicalJournal，2008，Vo1．29，No．6 ·631 · 论著 人 TCPllL2和 鼠Tcplll2基因的定位及表达的初步研究 王新颖，马用信 ，刘燕燕，卢亦路 ，曾 梅 ，彭 艳，陶大昌 (四川大学华西医院医学遗传研究室暨生物治疗 国家重点实验室疾病基 因组学研究室，四川 成都 610041) 【摘要】 目的 观察人TCP11L2和鼠Tepl112基因在细胞中的表达及定位和 Tep1112基因的表达谱研究。方法 用RT-PCR法从正常人和鼠睾九组织中分别扩增得到人TCP11L2基因和鼠Tepl112基因的开放读码框全长eDNA并定向 克隆到真核表达栽体 pEGFP-N1质粒 中，构建 了pEGFP-TCP11L2和 pEGFP．Tepl112融合基 因表达载体 ，然后 以脂质体介导 转入 MDCK细胞 中，荧光显微镜下观察融合基 因的表达情况 ；RT-PCR检测鼠Tcpl112基 因在组织中的表达情况。结果 在转染重组真核表达载体pEGFP．TCP1112、pEGFP-Tcpl112的MDCK细胞 中，荧光主要集中在细胞核外区域 ，而在转染空 白载体 pEGFP-N1的细胞 中，荧光布满整个细胞 ；RT-PCR检测鼠Tepl112为多组织表达。结论 人 TCP11L2和 鼠Tcpl112 蛋 白能在 MDCK细胞 中高效表达 ，表达 的蛋 白定位在细胞核外区域 ，鼠Tcpl112的多组织表达提示该基 因与鼠Tcpl1基 因功能 的不 同。 【关键词】 人TCP11L2基因；鼠Tpl112基 因；脂质体转染；亚细胞定位 【中图分类号】 Q78 【文献标识码】 A 【文章编号】·1004．0501(2008)06．0631．03 A studyonthelocalizationandexpressionofhTcPl112na dmTcplll2．WANG胁 一 ，MA Yong-xin，LIU Yah—yah，eta1． I 口rz，Ⅲ} ofMedicalGenetics，WestChinaHospital，SichuanUniverstiy，andDivisionofHumanmorbidGenomics，StateKeyLaboratory ofBoitherapy，Chengdu，Scihuan610041，China 【Abstract】 Objective ToobservethesubcelluarlocalizationofhumanTCP11L2(hTepl112)andmouseTcpl112(mTepl112) geneintheMDCK celland study theexpressionprofileofmTepl112 inmouse．Methods openreadingframesofhTCP11L2and mTepl112wereobtainedbyRT-PCR from normaltestistissueand then cloned intopEGFP-N1 vcetor，respectively named pEGFP— hTepl112andpEGFP—mTepl112．TheMDCK cellwastransfeetedwithpEGFP．TCP1112 andpEGFP-Tepl112usinglipofectionmethod andthenobservedthroughfluoresceneemicr