植物内源乙烯组织定位测定方法的的研究.pdfVIP

河南农业科学 植物内源乙烯组织定位测定方法研究 1 2 2 2 凌 　喆 ,郑淑芳 ,吴 　萍 ,李 　武 ( 1. 天津市农业科学院 ,天津 300 192 ; 2 . 北京市农林科学院 蔬菜研究中心 , 北京 100097) ( ) 摘要 : 高氯酸和氯化汞混合液 简称反应液 对乙烯具有极强的吸收能力 ,遇盐酸后释放出乙烯 。 利用这一原理确立了一种植物内源乙烯组织定位测定方法 , 即将 1 g 白菜样品浸入反应液中 20 h 后 ,研磨 ,离心 ,取上清液 1 mL 于 Wat er s 液谱样品瓶中 ,加 2 mol/ L 盐酸 1 mL 后密封 ,30 ℃保温 5 h ,取气样 1 mL 测定乙烯 ,通过乙烯释放量确定组织中内源乙烯含量 。同时还对该方法的一些影 响因素进行了研究 。 关键词 : 内源乙烯 ; 定位测定 ; 高氯酸 中图分类号 : Q945 　　文献标识码 : A 　　文章编号 : (2008) 04005 103 ( ) 　　乙烯在植物生长发育过程中具有重要作用 。分 乙烯 99 . 9 % 注入输液瓶 中 , 振荡 2 h , 室温放置 析测定组织内乙烯浓度可了解其在组织内的生理状 24 h 。从输液瓶中抽取 1 mL 气样 ,测定未被吸收的 态 ,并可用作判断果实发育程度的指标 。测定组织 乙烯量 。1 mL 乙烯减去未被吸收的乙烯 , 即为乙烯 内乙烯浓度的方法是先收集组织内的气体样品 ,然 吸收量 。稀释已吸收乙烯的氯化汞和高氯酸混合液 后用气相色谱法测定乙烯 。目前广泛使用的组织内 1 ×、10 ×、100 ×、500 ×和 1000 ×,用于测定乙烯释 乙烯采集方法可归纳为 : ( 1) 果腔取气法 ,用注射器 放量 。 直接从果实的腔体内采集气样 。此法适用于具有腔 1. 3 　标准乙烯取样方法 ( ) 取 1 mL 已吸收标准乙烯的氯化汞和高氯酸混 体的果实 。 2 真空取气法 ,对组织进行减压处理 , 使组织内的气体逸出组织后收集气样 。此法适用于 合液于标定容积的 Wat er s 液谱样品瓶 [ ( 4 . 80 ± 任何组织[ 1～3 ] 。果腔取气法和真空取气法只能采集 0 . 02) mL ] 内,加 2 mol/ L H Cl 1 mL ,迅速拧紧瓶盖 , 腔体和细胞间隙内的气样 ,而组织细胞间隙体积只 在混合器上振动 5 s ,置样品于不同的反应条件 ,取 占组织总体积的 1 %～25 % ,溶于细胞质 内的乙烯 出样品瓶 , 用注射器从橡胶盖处 向样 品瓶 中注入 无法收集 。我们利用氯化汞和高氯酸混合液能吸收 1 mL 饱和 N aCl 溶液 , 同时另一注射器抽取 1 mL 气 乙烯 ,混合液内加入盐酸后乙烯会再次释放的特性 , 样 ,用气谱测定乙烯含量 。 研究了以氯化汞和高氯酸混合液为乙烯吸收剂 ,测 1. 4 　乙烯测定 定组织内全部乙烯含量的可行性 。 乙烯用岛津 - mini 3 型气相色谱仪测定 ,色谱 柱 4 ×2 000 mm , G.