X射线辐照后人肝细胞、肝癌细胞存活和端粒酶活性关系的研究.pdfVIP

第28卷第2期 辐射研究与辐射工艺学报 V，01．28．No．2 2010年4月 J．Radiat．Res．Radiat．Process． 2010 April X射线辐照后人肝细胞、肝癌细胞存活与 端粒酶活性关系的研究 刘金婷1’2党秉荣1李文建1荆西刚1 魏巍1王转子1丁楠1高清祥3 1(中国科学院近代物理研究所兰州730000) 2(中国科学院研究生院北京100049) 3(兰州大学生命科学院兰州730000) 摘要利用x射线对体外培养的人肝癌细胞SMMC．7721和正常人肝细胞IlL．7702进行辐照，以细胞克隆形 成法测定细胞存活率，多聚酶链式反应银染端粒重复序列扩增法(Telomeric repeatamplificationprotocol, TRAP．PCR)检测细胞中端粒酶活性变化，探讨辐照后细胞存活与细胞中端粒酶活性变化的关系。结果表明， 端粒酶活性变化均呈剂量依赖性增强。但在lC,y、2Gy、3cry剂量下，SMMC．7721其端粒酶活性较对照 (0 C,y)细胞低：当辐照剂量达4Cry时，端粒酶活性略高于对照细胞。在l—4G，剂量范围内，HL．7702和 SMMC．7721的细胞存活与端粒酶活性在变化趋势上呈负的关系。 关键词x射线，细胞存活率，端粒酶活性，SMMC-7721，HL．7702 中图分类号Q691，R730 端粒是存在于真核生物染色体末端的一种特殊 酶活性分别下降了82％和93％[21。端粒酶阳性的宫 的DNA结构，由串联重复的DNA序列及其相关的 蛋白组成，其功能是防止染色体的端．端融合、重组， 以维持染色体结构的完整性。端粒酶(Telomerase)不到端粒酶活性；25 Gy^r射线照射小鼠肿瘤，发现， 对照组小鼠肿瘤的端粒酶活性水平没有变化，受照 是一种核糖核蛋白(Ribonucleoprotein)，由RNA 和蛋白质构成，具有反转录酶活性，其最主要的功 射鼠的肿瘤的端粒酶活性水平在照射后大幅下降， 能是延长端粒。1989年，Morin[1】首次在人肿瘤细而且他们认为细胞存活下降与端粒酶活性下降是成 胞HeLa细胞中检测出端粒酶活性。此后，端粒酶 研究一直是生物学和肿瘤学研究的一个热点。 癌细胞KB在受到2 Gy、4Gy、8GyY射线照射后 恶性肿瘤是常见的临床疾病，也是导致人类死 端粒酶活性下降，这种下降与辐射剂量成正比L4J。辐 亡的主要原因之一。放射治疗是肿瘤治疗的主要手 照后细胞存活下降，端粒酶活性水平降低的研究结 段之一，50％一70％的癌症病患需要接受放射治疗。 果使得端粒酶活性水平被认为反映了细胞存活情 放射治疗后肿瘤细胞的存活状况是肿瘤复发的重要 况，端粒酶活性测定可作为评估放射疗效的可靠指 原因。因此如何评价电离辐射对肿瘤细胞的杀伤性 是放射治疗的一个重要问题。端粒酶与肿瘤的发生 粒酶与细胞存活之间的一种关系。但目前国内外的 发展关系密切，放疗与端粒酶活性关系研究也成为 研究并没有对细胞存活与端粒酶活性变化关系进行 放射医学研究的焦点之一。部分研究结果说明，辐 具体的分析，两者间的关系还存在争议，相关结论【3】