利用荧光定量PCR进行饲料中牛羊源性成分检测的快速筛选.pdfVIP

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2015-07-25 发布于河北
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利用荧光定量PCR进行饲料中牛羊源性成分检测的快速筛选.pdf

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利用荧光定量PCR进行饲料中牛羊源性成分检测的快速筛选.pdf

36 2010 37 6 PCR 1 1 1 1 1 2 1 , , , , , , ( 1. , 100125; 2. , 430064) : PCR , , , , , PCR 100 :; ; PCR; :S813. 3 :A : 2010 ( bovine spongi , , for encephalopathy,BSE) , , , ,1985 , (, 2001) PCR , ( prion) , ,, , , 1 ( ,2007) 1. 1 试剂及试剂盒 , DNA 2 T aq PCR Master ix50 bp (ELISA) ( PCR) PCR DNA Ladder ( ) DNA ;SYBR Pre ix Ex T aq () , , ; AD001 , AD002 , : AD001: TTTGGTCCCAGCCTTCCTGTT; PCR ( GB/T20190 AD002:CTTAGT CAAACTTTCGTTT 2006; GB/T21104 1. 2 样品制备 1~ 1. 5 2007) , DNA D c ,30 in , loop , , ,PCR ,0. 001%~ 100% ,PCR 1. 3 饲料总DNA 的提取及测定 , 50.0 g , (,2007) ,1% DNA DNA , GA , 4 L 100 g/ L :( 1964- ) , , , , DNA RNA 5 in, DNA : , , , Tel:01059194664; E 100 L TE 3 , ail:yulei0229@hot ail.co 2 L DNA 2010 37 6 37 ,NanoDrop nd1000( Ther o Fisher ) , 3, 1.4 牛羊源性成分的PCR 及荧光定量PCR 检测 , AD001 AD002 PCR , 50 L: AD001( 5 ol/L) 2 L, AD002( 5 ol/L) 2 L, 10 L, 2 T aq PCR Master ix 25 L, 11 L :94 ! 5 in;94 ! 30 s,55 ! 30 s,72 ! 30 s, 30 ; 72 ! 5 in, 4 ! 5 L PCR 2. 5% 1 AD001AD002 ,SYBR Green : M, 50 bp DNA Ladder; 1, 100% ;