高效液相色谱／串联质谱法快速鉴定Z／E盐酸头孢吡肟异构体.pdfVIP

维普资讯 第 34卷 分析化学 (FENXIHUAXUE) 研究简报 第9期 2006年9月 ChineseJournalofAnalyticalChemistry l278一l282 高效液相色谱／串联质谱法快速鉴定 Z／E盐酸头孢吡肟异构体 王少敏 ’ 邹大鹏。’ 张建业。 李华雨。刘宏民 (郑州大学化学系 ，新药研究开发中心 ，郑州450052) 摘 要 采用高效液相色谱／串联质谱技术建立了快速鉴定 z型盐酸头孢吡肟原料药中E型异构体杂质的 新方法。以乙腈-醋酸盐缓冲溶液 (4：96)为流动相经C．。柱分离，通过高分辨电喷雾串联质谱在线检测，获得 了相关的色谱和质谱信息。在所建立条件下，z型盐酸头孢吡肟及其 E型异构体杂质获得了有效分离，保留 时间分别为5．22min和 l4．60min，同时它们的二级质谱及裂解方式呈现明显差异。本法能在无对照品情况 下，快速、准确地分离鉴定盐酸头孢吡肟原料药中的Z／E异构体。 关键词 高效液相色谱 ／串联质谱法 ，盐酸头孢吡肟 ，Z／E异构体 1 引 言 随着药物构效关系研究的深入，药物异构体的分离分析 日益被人们所重视。高效液相色谱．串联质 谱 (HPLC—MS／MS)技术集液相色谱的高分离能力和质谱的高分辨力、高灵敏度于一体，是进行微量杂质 检查和降解产物分析鉴定的强有力分析工具之一 【。’。通过 HPLC可以有效地分离异构体，而结合 MS／MS技术就可得到更多的结构信息 J。盐酸头孢吡肟 (cefepimedihydrochloride)是20世纪90年代 上市的第四代头孢菌素(I，结构式见图1)，具有更广谱高效的抗菌活性和对细菌 一内酰胺酶的高度稳 定性，近年来在临床上广泛用于治疗各种细菌感染性疾病并取得 良好疗效l4】。在本品的合成及原料药 的降解过程中，发现总伴随有微量E型异构体杂质 (Ⅱ)的生成，但到目前为止，虽有文献报道对盐酸头 孢吡肟△／△异构体的分离鉴定 ]，但分离检测其Z／E异构体的报道很少，且检出H~1~7较长 ]。由于 样品中E型异构体杂质相对含量太少 (小于0．5％)，有时对照两个分离峰的紫外色谱图也不足确定它 们为一组Z／E异构体，并且E型异构体对照品的价格昂贵且不易购得。而采用 HPLCMS／MS联用技 术，通过对主成分及其E型异构体杂质的色谱和质谱分析，可以在无对照品的情况下，对杂质进行快速 确认，并确保方法的可靠性。 OCH CHO＼ ， IIIHH HllHH u Ipl …… u Ipl COOH COOH l II 图I Z型盐酸头孢吡肟(I)主成分及其E型异构体杂质(II)结构式 Fig．I StructuresofZeefepimedihydrochloride(I)anditsEisomerimpurity(Ⅱ) 2 实验部分 2．1 仪器与试剂 MicromassQ—TofMicroM。高分辨质谱仪 (美国Waters公司)；AllianceHPLC系统 (美国Waters公 司)：(1)2695分离单元 (2)2996光电二极管阵列检测器；WatersMasslynx～4．0软件系统。z型盐酸头 孢吡肟原料药及 z型、E型盐酸头孢吡肟对照品(河南吴宁制药有限公司)。乙腈为色谱纯 ，乙酸铵、乙 酸为分析纯，超纯水。 2．2 液相色谱 ／质谱条件 2005—12—18收稿；2006-04—11接受