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组织培养综述 第一章　绪论 　 一.植物组织培养的含义??（广义）又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织.器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。　　　（狭义）组培指用植物各部分组织，如形成层.薄壁组织.叶肉组织.胚乳等进行培养获得再生植株，也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养，愈伤组织再经过再分化形成再生植物。二.1902年德国植物生理学家Haberlandt提出了“细胞的全能性”原理。三.1962年Marshing和Shong发明了MS培养基.???? 　　四.植物组织培养的意义：　　　　　　　　⒈加速无性繁殖;⒉获取脱毒苗;⒊扩大变异范围：⑴克服远缘杂交后代不育性和杂交不亲和性。⑵通过原生质体融合获得体细胞杂种和胞质杂种。⑶倍性育种：通过胚乳培养获得三倍体；通过花粉和花药培养进行单倍体育种。⑷结合诱变育种在试管内进行优良变异的诱导.选择和繁殖。⒋加速亲本材料的纯化。一般选育自交系需4－6代花粉培养获得单倍体植株，染色体加倍后即为纯合二倍体。⒌种质资源的试管保存。⒍为基因工程的全面实施人工控制遗传方向打下基础。 第二章　植物组织培养的原理 一.名词：1.外植体〔explant〕：从植物体上分离下来的用于离体培养的材料。2.分化〔differentiation〕：细胞在分裂过程中发生结构和功能上的改变，从而在个发育中形成各类组织和器官完成整个生活周期。3.脱分化〔dedifferentiation〕:已分化好的细胞在人工诱导条件下，恢复分生能力，回复到分化组织状态的过程。4.再分化〔redifferentiation〕:脱分化后具有分生能力的细胞再经过与原来相同的分化过程，重新形成各类组织和器官的过程。5.愈伤组织〔callus〕:在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞，多在外植体切面上产生。6.胚状体〔embroid〕:—对应于胚〔embryo〕，在离体培养过程中产生一种形似胚（具有明显的根端和芽端），功能与胚相同的结构。7.继代培养：更换新鲜培养基来繁殖同种类型的材料（愈伤组织.芽等）。二.根据外植体不同可分为几类?⒈胚胎培养，⒉器官培养，⒊组织培养，⒋细胞培养，⒌原生质体培养。三.根据培养方式不同可分为几类?⒈固体培养，⒉液体培养，⒊半固体培养，⒋双层培养。四.简述离体培养中植株的形态建成⒈通过愈伤组织分化芽，再分化根。⒉直接分化芽和根。⒊直接分化根，再分化芽。⒋外植体直接产生胚状体。五.细胞全能性〔totipotency〕是什么?指每个植物细胞都具有形成完整植株的能力，因为每个细胞都具有全套的遗传基因，无论是性细胞还是体细胞在特定条件下可以进行表达。条件：有生命力的核；完整的膜系统。 第三章　组织培养的基本条件和方法 　 一.简述组培室的设置及各室的用途1.准备室：⑴进行药品的保存、配置、消毒、分装等。⑵器具的洗涤、干燥、消毒。　⑶生理生化指标的测定等。2.接种室：进行材料的接种。外设缓冲间—放置拖鞋.工作服.工作帽等。3.培养室：植物材料的无菌培养。外设缓冲间—放置拖鞋.工作服等。4.细胞学观察实验室：进行培养材料的组织学.细胞学.观察照相等。二.详述影响组培的因素⒈植物因素：⑴基因型，⑵植物年龄，⑶组织和器官的年龄，⑷植物的生理状态，⑸取材年份及生长条件，⑹取材部位及大小。⒉培养基因素：无机盐；有机化合物；植物激素；天然提取物；琼脂；PH值；渗透压；活性炭。3.环境因素：⑴光照：包括光强.光质.光周期。⑵温度。⑶湿度。⑷气体。三.培养基的主要组成成分⒈无机盐：大量元素：C.H.O.N.P.Ca.Mg.S。微量元素：Fe.Cu.Mo.Zn.Mn.Co.B.Na。水：培养基95%是水，应使用蒸馏水或双蒸水，使用去离子水。水应放在塑料容器中。纯净水也可。⒉有机化合物：⑴糖，⑵维生素类，⑶氨基酸类⒊植物激素（生长调节物质）⑴生长素：主要包括IAA、NAA、2,4-D。⑵细胞分裂素：天然：BA（6－苄基酰嘌呤）、KT（激动素，糠基酰嘌呤）；人工：ZT（玉米素）、2iP（异戊烯酰嘌呤）。⑶赤霉素：GA3。⑷乙烯及乙烯抑制剂。⒋天然提取物。⒌琼脂。四.控制组培中形态建成的激素模型　　生长素与细胞分裂素的比例五.植物激素的主要生理作用　　影响培养中器官建成六.培养基的固化剂有哪些，作用是什么?　　琼脂、Gelrite、塑料泡膜、玻璃丝、岩棉、玻璃珠、Gala胶。　　作用：束缚水分、吸收化合物七.灭菌方法有哪些，各有何利弊1.高压蒸气灭菌；2.燃烧灭菌；3.干热灭菌：易引起火灾；4.射线 灭菌：适于不耐高温材料。八.植物材料的常规消毒步骤