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- 2015-07-26 发布于贵州
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2013人教版选修一课题3《血红蛋白的提取和分离》课件ppt1.ppt
血红蛋白 1、凝胶色谱法 凝胶色谱法也称为分配色谱法,它是根据分子量的大小分离蛋白质的方法之一,又称分子筛层析 。 凝胶实际上是一些微小的多孔球体,例如:浮石、琼脂、琼脂糖、聚乙烯醇、聚丙烯酰胺、葡聚糖凝胶等 最常用的电泳支持介质是聚丙烯酰胺和琼脂糖凝胶。琼脂糖有一个相对较大的孔径,用来分离大分子例如核酸、大蛋白和蛋白复合物,聚丙烯酰胺形成孔径较小的胶,适合于分离大多数蛋白和小片段核酸。 二、实验步骤 初次离心后的结果 (3)分离血红蛋白溶液: 凝胶色谱柱的制作 4、纯度鉴定(电泳)SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 1、垂直板电泳装置 2、稳流稳压电泳仪; 3、微量进样器(可用微量移液器代替) (5)装槽、点样: 拔出梳子→ 将胶板固定在电泳槽上(凹板一侧向内) →在电泳槽中加入缓冲液→ 点样。 (6)电泳: (7)、剥胶、染色及脱色 凝胶板剥离:电泳结束后,撬开玻璃板,将凝胶板做好标记后放在大培养皿内,加染色液染色,然后用脱色液脱色。 (8)、结果 3、SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳: 2.试剂的配制: 鉴定血红蛋白纯度。 1.目的: ①丙烯酰胺和N, N-亚甲基双丙烯酰胺: 用去离子水配制29
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