2013苏教版选修3第一章第一节《基因工程概述》课件ppt.pptVIP

直接分离基因：最常用的方法是“鸟枪法”，又叫“散弹射击法”。鸟枪法的具体做法是：用限制酶将供体细胞中的DNA切成许多片段，将这些片段分别载入载体，然后通过载体分别转入不同的受体细胞，让供体细胞所提供的DNA(外源DNA)的所有片段分别在各个受体细胞中大量复制(在遗传学中叫做扩增)，从中找出含有目的基因的细胞，再用一定的方法把带有目的基因的DNA片段分离出来。如许多抗虫、抗病毒的基因都可以用上述方法获得。 反转录法：先分离出目的基因转录出的mRNA，再在反转录酶的作用下，以RNA为模板合成所需要的目的基因。 此外，也可以根据目的蛋白质的氨基酸序列，先人工合成出相应的RNA，再用反转录法得到目的基因。 第二步：制备重组DNA分子。常用的载体有细菌质粒、噬菌体、动植物病毒等。具体做法是：先用同一种限制酶处理目的基因和载体，使两者形成相同的黏性末端(或平口末端)，然后利用DNA连接酶将两者连接成重组DNA分子。 重组DNA分子的组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因，如图。 (1)启动子：一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端。它是RNA聚合酶识别、结合的部位。 (2)终止子：一段有特殊结构的DNA短片段，位于基因的尾端。作用是使转录过程停止。 (3)标记基因：一般为抗生素抗性基因或荧光基因等，其作用是鉴别细胞中是否有目的基因(目的基因是否导入成功)。 第三步：转化受体细胞。载体一般