人肝组织谷氨酰转肽酶mRNA亚型转化和肝细胞癌变关系的研究.pdfVIP

22卷第 4 V 243 · 论著摘要 · 人肝组织谷氨酰转肽酶 mRNA亚型转化与 肝细胞癌变关系的研究 韩 国庆 秦成勇 与正常肝组织相 比．肝癌细胞表达 的 备氨酰转肽酶 型为F—H(6例)或 F—P(5例)，在6例 H哑型阳性者 中包括慢 (GGT)具有特异 的糖链结构 但是在肝细胞癌变过程 中． 性活动性肝炎及肝硬化各 3例 ，本组中各 GGTmRNA哑型阳性 GGT异常表达的机制 尚不清楚。我们检测人肝组织及肝癌 率与健康对照组 比较 ，差异无显著性。②在癌组织中．主要 的 组织三 种 GGT mRNA亚 型，分 析 不 同疾 病 肝 组 织 的 GGTmRNA亚型为 H亚型，其阳性率明最高于对照组及非癌肝 GGTmRNA亚型．探讨 GGTmRNA亚型转化与肝细胞癌变 病组(P0．05)，而 GGTmRNA-F亚型 的阳性率明显低于对照 的关系。 组及非癌肝病组(P005) 在癌旁厦远癌组织中主要的为 F 一 、 材料与方法 及 H亚型 H亚型的阳性率均显著高于健康对照组及非癌肝病 1研究对象：按肝病 的种类分为 四组①正常健康对照 组(P005) F及 P亚型的阳性率与健康对照及非癌肝病组 组 11倒 ；②非癌肝病组 29倒 其 中急性病毒性肝炎 6例 ，慢 比较差异无显著性。③转移性肝癌癌周组织 的=种 GGT 性肝炎 15倒 ．肝硬化 8倒 ；③原发性肝癌组 26倒 ；④转移性 mRKA亚型的阳性率与健康组及非癌肝病组相 比较差芹l无 显 肝癌组 12倒 ．其 中原发病为肺癌 4倒 ，胃癌 4例 ，结肠癌 2 著性 倒，卵巢癌 1倒，前列蒜癌 1倒。以肝穿刺活检或手术莸取 讨论 如何早期监测肝细胞癌变仍是肝癌诊断的难题 j。 肝组织 (转移性肝癌组获取 的是癌周组织)；肝癌组织、癌旁 人类GGT基因位于 22号染色体 q_I—qt盯的BCR基 因相关区 组织 (距癌灶边缘 3en|以内)及远癌组织 (距癌灶边缘 域 ．对胎肝、人肝癌组织(H~VG)及胎盘组织 GGTcDNA文库 的 5en|)。 研究显示 ：它们之 间的主要 区别在于其 5-NC区 而 口J凄框架 2 RNA提取及逆转录多聚酶链反应(R PCR)：取肝组 ORF相同 。根据上述三种 GGTcDNA的5NO区丹别设计 织50mg按文献 [1]方法提取总 RNA，于岛津 uv一2201紫外 RT-PCR反应所需的特异性引物 GGTmRNA源于人胎肝的称 分光光度计上测总 RNA浓度(rag／g组织) 之为GGTmRNLk,F亚型；源于 卜I甲 肝癌细胞的称 为H亚型 ； 根据GGT基 因5’+NC区设计 3种 GGTmRNA亚型的 源于胎盘的称 为P亚型。 引物 ，由上薄生工工程公 司合成 。以RNA为模板合成 本研究中正常肝组织与非癌肝病肝组织主要的 TmR cDNA．以cDNA为模板进行 PCR基 因扩增 ，反应条件为：预 NA类型为F亚型；在肝癌组织中主要为H亚型；在痛旁组织及 变性 94℃ 3mirtl变性 94。c30s，退火 58’c30s，延伸72℃ 30 远癌组织中主要为 F和 H亚型。肝癌癌组织及癌旁 远癌组织 s，循环 30次；最后 72℃延伸 8mitt，得到反应终产物 预期 H亚型的阳性率明显高于正常肝组织及非癌肝病组织 ．而肝癌 终产物分子 大小：F亚 型 308bp，H亚 型 300bp，P亚型