电泳羟基磷灰石色谱吸附特性的研究.pdfVIP

电泳羟基磷灰石色谱吸附特性研究 殷钢詹劲刘挣 (清华太学化学工程系，北京100084) 摘要将电泳与羟基磷灰石色谱棱术枷告，开发了一种新的电泳色谱技术．本文利用两套不同的装 置在电场下对羟基磷灰石(HAP)暧附牛血清白蛋白{BsA)过程中的反应与侍质分别进行研究．研究结 果表明，电场不套政变吸附反应的平衡与速率；在电泳羟基磷灰石色谱中，颗粒表面在电场中产生 的电渗流能够加强扰动．减少在渡膜中的扩散阻力．强化传质． 关键词：电泳羟基磷友石色谱羟基磷灰石色谱电渗 引言 且具有很高的分辨率【2耶】。但是，HAP晶体结构致密，分离时阻力大，吸附流速低，处理通量小， 这些缺陷严重阻碍了它的大规模工业应用。本文提出了一种新型的电色谱技术．在羟基磷灰石色 谱的分离过程中引入电场(称电泳羟基磷灰石色谱，EHC)，可以利用电渗流强化传质。本文以牛血 Serum 清白蛋(Bovine 传质的影响。 1实验材料与方法 1．1实验材料 SerumAblumin 羟基磷灰石为Merck公司(德国)产品，采用的蛋白质是牛血清白蛋白Boythe Mannheim，德国)．其他试剂均为国产分析纯。 (BSA)(Boehringer 1．2实验装置 实验装置l是一个体积为50ml带有磁力搅拌器的间歇式反应器，并配有恒温水浴夹套，电极 腔室和反应器用琼脂做成的盐桥隔开并导通．如图L所示。 实验装置2为一个多腔室多通道电泳槽，中间腔室填充羟基磷灰石。该装置同时配有很好的 温控系统和检测系统，如图2所示。 1．3实验方法 在实验装置1中，分别进行不同电场下等温吸附线以及吸附动力学曲线的测定。 在实验装置2中。研究电泳羟基磷灰石色谱的吸附动力学特’性，即穿透曲线的测定。 实验中所用的缓冲溶液若无特殊说明，均为pH6．8．0．002M磷酸缓冲溶液，实验温度为4℃。 2实验结果与讨论 2．1不同电场下等温吸附线的测定 实验研究了HAP对BSA的等温吸附曲线。施加O-400V的交变电场，实验结果如图3所示。， 不同电场下得到的吸附平衡曲线及吸附动力学曲线基本重合，表明电场的存在并改变吸附反应的 平衡关系。 478 蕾。蝴n 一$$t口 1一碳棒电极 2一电极腔室 3一盐桥 4～电源 5--反应器 6一碰力搅拌嚣 图1间歇式全混反应器 囤2电泳羟基磷灰石色谱装置流程图 e 至 i 盆 呈 ≈ 叶哪¨*√，≈偻 黎。黪 三 图3 HAP对BSA的等温啦5付线 图4 HAP对BSA的吸附动力学曲线 HAP对BSA的吸附平衡常 用Langmuir等温吸附方程拟合所测实验数据．得到在实验条件FI 数和饱和吸附容量，计算结果见表1。结果表明由于实验所加电场的能量比较低，不足以改变吸附 反应的平衡常数和饱和吸附容量。 2．2有电场与无电场吸附动力学对比 实验研究了在无电场和电压为300V时．HAP对BSA的吸附动力学，实验结果如图4所示。 由于实验在高速搅拌中进行，颗粒表面的液膜变得很薄，物质在其中的扩散路径减小。实验 结果表明在两种情况下吸附随时间变化基本是一致的，因此电场的存在不改变吸附反应的动力学 特性。 表1拟和计算得不同电场下的吸附平衡常数和饱和吸附容量 2．3电泳羟基磷灰石色谱吸附动力学曲线的测定 实验研究了在不同电流强度下电泳羟基磷灰石对BSA的吸附行为．BSA上样浓度为5 mL·min～。为减少浓差极化影响，采用不等周期交变电场：正向电场15s， mg·mL一，流速为0．4 反向电场ls，电流为0-80mA，实验结果见图5。