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2015-07-27 发布于安徽
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PCV2Flagellin-ORF2果蝇稳定表达系建立.pdf

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PCV2Flagellin-ORF2果蝇稳定表达系的建立张春燕韦莉王菁朱珊珊全荣闫旭柳舒航李子璇刘爵北京市农林科学院畜牧兽医研究所，北京100097 摘要：猪圆环病毒2型(PCV2)是一种可导致断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)、猪呼吸疾病综合征(PRDC)、猪皮肤和肾病综合征(PDNS)等多种疾的DNA病毒。目前国内外研制的多种形式的PCV2疫苗为此病的防控发挥了显著的作用，但是效果仍不理想。而国际上正在研制的ORF2核酸或蛋白疫苗越来越成为PCV2的理想候选疫苗。鞭毛蛋白可刺激机体产生前炎性因子，在连接天然免疫应答和获得性免疫应答中起重要作用。本研究通过将编码鞭毛蛋白的基因和ORF2基因融合克降进pMT/Bip/VS-HisA表达载体，转染S2细胞，用CuSO4诱导目的蛋白的表达，并通过间接免疫荧光(IFA)和Westernblotting进行鉴定，筛选到的单克隆S2细胞有明显的荧光反应，表达的蛋白能与小鼠V5单抗和兔PCV2抗血清结合，从而建立了能稳定表达此融合蛋白的果蝇表达系统,为 PCV2新型疫苗的研究奠定了基础。关键词：PCV2;ORF2;鞭毛蛋白；S2细胞；新型疫苗 tds辐照的， )5/孔。抗怊．、2个/孔、 }度稀释10m 肾病综合征(PDNS 制的多种形式的P 用，但是效率仍不j ~, TikooS 2protein en 91,2001,285(I, ~PDl~m口n盘n 1]WilsonIA,SkehelJ agglutininmembrane resolation[J].Nature,19