非诺贝特对非酒精性脂肪肝大鼠脂质代谢和PPARα表达影响.pdfVIP

华东地区第十二届实验动物科学学术交流会 399 非诺贝特对非酒精性脂肪肝大鼠脂质代谢和PPARQ表达的影响 楼琦，李巍，石巧娟，刘月环，柯贤福，卢领群，郭红刚，周文伟，萨晓婴 (浙江省医学科学院实验动物中心，杭州310013) [摘要]目的观察非酒精性．脂肪肝(NAFLD)大鼠肝组织中PPAR。C【的表达，并用PPAR0【激动剂非诺贝 特进行干预，探讨其与胰岛素抵抗、脂代谢紊乱、细胞凋亡的：是系。方法大鼠随机分为①正常对照 组、②高脂模型组、③非诺贝特组，利用高脂饮食建立大鼠非酒精性脂肪肝模型。12周后，检测大鼠 血脂、肝功能、血糖、胰岛素水平、胰岛素抵抗指数；RT-PCR法分析PPAR blot法及免疫组化法分析P】)ARo【蛋白的表达；TUN?寸EL法检测肝脏细胞凋亡情况，病理切片观察肝 q 响，不能有效地抑制细胞凋亡的发生。结论非诺贝特能改善N。CFLD大鼠脂质代谢紊乱，有明显的保 肝降酶作用，具有适度的胰岛素增敏作用。 [关键词]非酒精性脂肪肝；非诺贝特；细胞凋亡；大鼠 activated 过氧化物酶体增殖物激活受体(Peroxisomeproliferation 激活的转录因子，具有多种生物学效应，白1990年被克隆测序以来，已得到广泛深入的研究。PPAR有三 0【主要表达于肝脏、肾脏、心脏等脂肪酸氧化器官，成为研究脂类代谢的分 种亚型，即a、p和1，。PPAR 子基础的热点【I，2J。有人用PPAR。0【激动剂处理培养的脂肪细胞，发现可促进脂肪酸向线粒体和过氧化物酶 体流动，促使脂肪酸氧化，使脂肪细胞反向分化，降低脂肪储存，从而增加胰岛素的敏感性，因此在胰岛 素调节中肝脏组织中PPARC【的作用非常重要【3j。PPARcc基因剔除的小鼠可引起脂肪肝，表明PPAR0【在 肝脏脂肪酸代谢平衡的维持中亦发挥重要作用一J。 在临床上得到了广泛应用【5】。有文献表明非诺贝特通过激活过氧化物酶增殖体激活物受体0【(PPARa)来 调节血脂代谢‘6～91。 因此，我们观察非酒精性脂肪肝大鼠中肝组织PPAR。C【的表达，并用非诺贝特进行干预，探讨其与胰 岛素抵抗、脂代谢紊乱的关系，进一步阐述非酒精性脂肪肝的发生机制，为临床治疗NAFLD开辟新途径。 1材料与方法 1．1材料 动物中心加工生产，高脂饲料在相关配制方法的基础上进行了改进‘10,11]，配方为：普通饲料80．5％、蛋黄 400 华东地区第十二届实验动物科学学术交流会 粉10％、猪油7％、胆固醇2％，三号胆盐0．5％。 公司；胰岛素放免试剂盒(IMK414)购自中国原子能科学研究院，由杭州市第二人民医院完成盲样检测；非 诺贝特为江苏恩华药业集团有限公司产品，批蛋黄粉为浙江省长兴县艾格生物制品有限公司 Ribonucle．9．se 产品；胆固醇，三号胆盐购于华东医药股份有限公司；DNA聚合酶为Takara公司产品； LIFE BASIC公司产品，逆转录酶MMLV为Fermentas inhibitor(RB)为BIO 物由上海生物工程公司合成。TUNNEL细胞凋亡原位检测试剂盒为BIO．HIGHTECH公司产品。蛋白酶抑 提试剂购自武汉博士德公司。兔抗鼠PPAR CRUZ产品。 O【抗体，p-actin为SANTA 1．2方法 型组(12只)、③非诺贝特干预组(10只)。①组以基础饲料喂养，②、③组以高脂饲料喂养，自由进水 进食，观察动物一般情况，每周称体重。 ③组在高脂饲料喂养2周后，以非诺贝特非诺贝特(80mg／kg) 经口腔灌胃给药治疗，每天一次，连续10周。在高脂饮食4，8周后，从高脂模型组取1只动