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Elabscience 生物素标记试剂盒 使用说明书 货号: EBLK0002 仅供研究使用 Manufactured By Elabscience. FOR RESEARCH USE ONLY. 产品介绍： Elabscience 生物素标记试剂盒提供了生物素标记所需全部试剂，用于含有氨基（NH -）抗 2 体的标记。生物素已经活化，可直接使用，每个试剂盒足以完成3次标记，每次可标记0.2-2mg。 试剂盒中包括6 个用于抗体标记脱盐的Filtration tube，不用透析，操作简便，熟练操作 90min 可完成整个标记过程。 产品特点：  试剂全面: 本试剂盒提供了生物素标记所需全部试剂。  快速: 整个过程仅需90min。  方便: 通过Filtration tube 即可脱盐，无需透析或者凝胶过滤。  使用灵活: 既可用于微量标记又可大量标记，每次可标记0.2-2mg。  理想的标记效果: 已经优化确定了最适的标记比例，降低标记不足或由于过度标记而失 活的可能性。 产品组成： 组分 规格 NH -Reactive Biotin 0.1mg/支×3 2 Labeling Buffer 10mL×1 DMF 500μL ×1 Filtration tube 0.5mL/管×6 标记过程需要仪器： 1. 10ul，50ul，200ul，1000ul 可调高精度移液器 2. 恒温箱（37℃） 3. 离心机（离心力可达到 12,000×g） 储存条件： 本试剂盒未开封前在2-8℃可稳定保存一年 Manufactured By Elabscience. FOR RESEARCH USE ONLY. 生物素标记反应原理： NH -Reactive Biotin 专一地与伯胺反应（N-末端及赖氨酸残基侧链）形成稳定的酰胺键 2 生物素标记NH -Reactive Biotin 使用量的计算： 2 每个反应中生物素试剂的使用量取决于待标记蛋白质的量和浓度。通过优化，我们确定 了标记2mg/ml 的抗体（IgG ，150KD），使用生物素和抗体的分子比为20:1 能达到较理想的 标记效果。 1、标记2mg/ml 的抗体，使用生物素和抗体的分子比为20:1 时，应加入生物素量的计算方 法： ml 蛋白× 2mg 蛋白 × 1mmolIgG × 20mmol 生物素 = mmol 生物素 ml 蛋白 150,000mgIgG mmol 蛋白 2、对于10mmol 的生物素溶液，应加入反应中该生物素体积的计算方法： mmol 生物素× 1,000,000 μL × L = ul 生物素 L 10mmol 计算示例： 对于0.5ml 2mg/ml 的IgG（分子量为150,000）溶液，需加入10mM的生物素溶液13.3ul。 0.5ml IgG × 2mgIgG × 1mmolIgG × 20mmol 生物素 = 0.000133mmol 生物素 1mLIgG 150,000mgIgG 1mmolIgG 0.000133mmol 生物素× 1,000,000 μl × L = 13.3ul 生物素溶液 L 10mmol 操作过程： 实验前准备： 1.仔细阅读使用说明书。 2.计算待使用NH -Reactive Biotin 的量。 2