基体辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪的离子延时引出新技术的研究.pdfVIP

基体辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪的 离子延时引出新技术研究 赵善楷+何维德查庆民 (中山大学测试中心，广州510275) 摘要：为了提高基体辅助激光解吸电离b行时间质谱仪(MALDI—ToF—Ms)的分 辨率，在自行研制的研究级激光飞行时间质谱仪上进行了离子延时引出fDelav Extraction，DE)新技术的实验研究．建立了新结构离子源和离子延迟引出的电子 控制系统及相应软件。通过电场模拟和实验，研究了样品相对质量、延迟引出时 间、引出电压对提高分辨率的影响。在使用40MHz瞬态记录仪的情况下．测得环 十肽(m，z=1214)分辨率为1734，胰岛素(州z=5375)为2】24． 关键词：激光飞行时间质谱仪 延时引出 高分辨率 基体辅勘激光解吸电离新技术面世以来己广泛麻川丁生命科学研究，特别近 几年来随着引入了离子延时引山新技术，高分辨MALDI．MS技术已成为生命科学 研究的重要手段。 在MALDI离子源中产生的离子具有不同初始速度．从而导致以不同时间E 抵检测器而影响分辨率。这种离子能茸分散对分辨率的影响可以通过离子反射透 镜加以消减．但对线性仪器!I【lJ形成i要影响。激光离子源虽然是一类表面电离渊． 但实际上解吸电离有些是在激光短脉冲过程中产生，有些则是在解吸后E行过样 中通过碰撞产生，这也造成了离子的空间分散和能姑的进一步分散。此外，激光解 吸电离的中性粒子或离子在真空中是角分散的．这也是空间分散的一个来源。 早在1955年，wiley利McLaren住其电子轰击离子源的E行时间质谱仪上． 曾提出}{{时间滞衍米实现剑达检测器平面的一阶能鲑聚焦．其延迟时间t(以us 计)可由F式确定 I_O．j 44dl(m，zV。)“2【l，w+(wV。)¨2】 式中d．为第一I也场的长度(mm)：V、为引出脉≯plU乐(V)：T为离子最可能的初始 动能(eV)；w由F式给定： w=(x／l+x)”2【(L，2d。)一(d2，dI)(I+x)】+x(d3／d1)-l 这里x=V。，VI．Vl为中问电极I也何：d2为第．：加述l上}场的K度(mmJ：L埏无场漂 移K：度。这也是MALDl．TOF．MS的延时聚焦技术的理论基础。书实I：．IIjT：MALDI 形成的离r的物理特性．延迟引Ⅱ；技术人人兜服J，离r．的夺nU分激、时『HJ分散乖¨ m 能量分散造成的影响，显著提高了仪器线性和反射的分辨率。 参照近年来国外有关研究成果，我们在自行研制的研究级激光飞行时间质谱 仪上，进行了离子延迟引出技术的实验研究，其基本思想就是让激光解吸电离的离 子产生于一个无场区，经过一段时间延时，再迅速施加电场，将离子引出。这样。 不同时间形成的离子将被置于同一起跑时间上，不同初速度离子在施加电场时t 由于距离引出极不同，所受场强不同，将会使距离远的离子以更快的速度飞向引 出极，从而达到不同初速离子同时引出的效果。 1实验装置 1．1基本仪器 实验在本室1992年底自行研制成功的研究级激光微探针飞行时间质谱仪上进 d‘YAG激光器。经3 行(如图1)。激光器为spectraPhysics公司的GcR．1l一3型N 倍频后得到355nm的紫外激光，脉宽6～8ns。飞行管为线性和反射两种兼备，飞 行距离分别为1．1m和1．5m。离子检测器为微通道板和电子倍增管的耦合结构。 信号经放大后由40MHz瞬态记录板(德国IMTEK公司)采集并送计算机处理。 1．2带有DE功能的离子源 图2是具有DE的离子源及控制框幽，离子源的推斥电极P．、第一电极P2第一二 电极^为直径10cm并略带聚焦面的平行平板，P：、^中孔径6mm，井装有透过率为 由Hv．提供恒稳高压(可调)．其问为近似无场区．^接地。由激光产生的离子被局 限在P．。P2之问，经过一段延时之斤．再在^上加～个负的阶跃高压脉冲，使其电俄 瞬时降低，将离子引山井加速．进入无场E行区。 1．3 DE的支持电路与控制 如图2所示，两组独立的恒稳高压Hvf，Hv，破接入离子源。HV，为O计30kv uT凋(以F均对lt离子而吉，f1：负离子时则极性相反)．直接接剑P。上，并经一 电流。故PI。P2同