力达霉素抗Ⅳ型胶原酶Fab%27片段偶联物抗肿瘤侵袭转移作用.pdfVIP

力达霉素抗Ⅳ型胶原酶Fab’片段偶联物抗肿瘤侵袭转移作用 1 2∗ 2 2 1 封云 ，邵荣光 ，任开环 ，李保卫 ，张征仙 （1 江苏大学基础医学与医学技术学院药理学系，镇江212013 ；2 中国医学科学院北 京协和医学院医药生物技术研究所，北京100050） 摘要：为阐明力达霉素（LDM ）与抗Ⅳ型胶原酶单抗小型化免疫偶联物Fab’-LDM 抗肿瘤侵袭转移作用，我们研究了Fab’-LDM 免疫偶联物对人纤维肉瘤HT-1080 细胞 侵袭能力；MMP-2 ，MMP-9 分泌及TIMP-1 表达水平的影响，同时我们研究了Fab’-LDM 对血管生成和HepG2 肝转移的抑制作用。Boyden Chamber 体外侵袭结果表明无发色 团的Fab’-LDM （Fab’-LDMa ）对HT-1080 侵袭转移存在剂量依赖性的抑制作用：20 、 40| 、60µM 偶联物抑制作用分别达到52 ±13%，59 ±18%，78 ±5.5% 。免疫组化染色 显示Fab’-LDM 和HT-1080 细胞或者组织呈特异性结合。明胶酶谱实验证实Fab’-LDMa 在10、20µM 水平分别降低MMP-2 ，MMP-9 分泌达到54.3%、74.4%和87.1%、89.8%， 同时RT-PCR 表明Fab’-LDM 提高TIMP-1 的mRNA 表达水平。Fab’-LDM 抑制新生血 管生成，5 和10pM Fab’-LDM 的抑制率分别为63 ±8.2%、90 ±7.5% 。体内试验表明， 0.1µmol/kg Fab’-LDM 偶联物抑制人肝癌HepG2 在裸鼠肝内原位转移率达83%。以上 结果表明小型化偶联物Fab’-LDM 对肿瘤侵袭转移有抑制作用，其抗侵袭转移机制涉 及多个方面，Fab’-LDM 有望成为新型抗肿瘤侵袭转移的生物治疗剂。 关键词: 力达霉素；免疫偶联物；Fab’ ；侵袭；转移 基金项目：国家973 基金项目（2009CB521807 ）；“重大新药创制”科技重大专项（2009ZX09301-003 ）； 国家自然科学基金项目）；江苏大学高级专业人才科研启动基金项目（06jdg045 ）。 ∗通讯作者 Tel: 010 Fax: 010 E-mail: shaor@public3.bta.net.cn The tumor invasion and metastasis inhibition effect of the immunoconjugate composed of lidamycin and anti-type IV collagenase monoclonal antibody Fab’ 1 2 2 2 1 FENG Yun , SHAO Rong-guang , REN Kai-huan , LI Bao-wei , ZHANG Zheng-xian (1 School of medical science and laboratory medicine of Jiangsu University, Zhenjiang 212013, China;2 Institute of Medicinal Biotechnology, Peking Union Medical College, Chinese Academy of Medical Sciences, Beijing 100050, China) Abstract: To investigate the tumor invasion and metastasis inhibition effect of the immunoconjugate composed of lidamycin and anti-type IV collagenase monoclonal antibody Fab’ fragment, we used