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动物饲料中的Clenbuterol的气质色谱法测定 吴平谷吴蕙玲 (浙江省卫生防疫站中心实验室杭州310009) 1 前言 Clenbuterol作为口-兴奋剂药物作用于肾上腺素受体，可用作治疗人类和动物肺病。 另外，高剂量添加于动物饲料中时，可以减缓蛋白质分解代谢，提高脂肪分解。但是各国 己被欧盟禁止使用于动物饲料。但由于CIenbucerol等口一兴奋剂有促进脂肪代谢、提高瘦 肉率”1等效果，仍被不法分子暗地里使用。国外对clenbuteml等口．兴奋剂测定的方法主 要有：Gc—FI-IR法…、酶免疫法…、Lc．Ms法”以及Gc．Ms法”等。本文对动物饲料中 C1enbuteml的提取、净化以及定性、定量进行了一系列研究。 2材料与方法 2．1仪器与试剂 Gc一5973 惠普6890 Ms色质联用仪，m-5(30m×0，25pm)弹性石英毛细管柱，K．D 旋转蒸发仪，超声清洗器。clenbuteml标准品购自sigma公司，乙酸乙酯、氯仿、乙酸 clenbuteml盐酸盐 酐等均为分析纯。clenbu钯r01标准储备溶液(100mg／L)：称取11．Omg 于100mL容量瓶中．加氨水数滴，用氯仿定容至刻度。标准工作溶液(2mg几)：将标准 储备溶液用氯仿稀释50倍。动物饲料来自浙农大饲料研究所。 2．2色谱条件 式(sIM)，监测离子(m应)：86，174AMu，溶剂延迟：3min。 2．3样品处理 (1)动物饲料中Cl∞buterol的提取”1：称取10．0 g左右经粉碎的动物饲料，加50．0札 0．01mol，L Ncl溶液．在超声清洗器中萃取30min，每隔10 min振荡一次，然后在50009 下离心10 min，分出上清液。重复一次，合并上清液。另外取饲料(不含clenbuter01)按 要求进行加标试验。 mL5mol／L mL (2)提取物中cIenbuteml的净化：取上清液，加2．0 NaoH溶液。加10 乙酸乙酯，振荡萃取，重复2次。有机相在60℃水浴中真空蒸发，氮气吹干。 (3)clenbuterol的衍生”1：蒸发剩余物加l，0 mL氯仿溶解，再加O．3mL乙酸酐衍生化， 氮气吹千，加1．0mL氯仿溶解。供oC．MS分析． 3结果与讨论 3．1 CIenbuterol标准品的色质分析 ．422． 准品经乙酸酐衍生化后采用GC．MS法测定，可以满足实验要求，相对J—vanGinkel等” 采用的硅烷化方法具有简便等特点。在图2的cl。nbuter01裂解方式中，离子碎片86(Ⅲ止) 为叔丁基类鼻一兴奋剂特征离子…，而且响应较大，因此将其与clenbuceroJ的另一碎片l74 作为定量离子。图3采用离子监测方式可以大大降低检测限。 TICWD · 50000 l 40000 ’，0000 人 图1 cIenbuterol标准品衍生物(0．19／L)总离子流色谱图(scanmode) 图2 clenbuteroI标准品衍生物质谱围 田3 cIenbuteroI标准品衍生物(抽E／L)总离子流色谱图(simmode) ．423。 3．2动物饲料中GIenbuterol的测定 一般动物饲料中clenbuterol盐酸盐的添加量为1～5×104。在本方法确定的条件下， 关系数为o．998。饲料中c