HTLV-1病毒Tax蛋白阳性T细胞中EGR-1表达调控机制.pdfVIP

HTLV-1 病毒 Tax 蛋白阳性 T 细胞中 EGR-1 表达调控机制 1,2 1 2 2 2 2 王 辉 ，韩静贤 ，牛志国 ，刘 威 ，高 彩 ，宋向凤 （1.新乡医学院医学检验学院，河南新乡 453003； 2.新乡医学院免疫学研究中心，河南新乡 453003） 摘要： 目的：探讨HTLV-1 病毒 Tax 蛋白阳性 T 细胞 TaxP 中早期生长反应基因-1 表达调控的机制。方法：构建 不同长度的EGR-1 调控序列报告基因，将其转染TaxP 细胞，加入NF-κB 抑制剂BAY 11-7082 或同等体积的DMSO ， 24h 后收集细胞检测荧光素酶活性；TaxP 细胞上清中加入 BAY 11-7082 或同等体积的 DMSO ，24h 后，免疫印迹 检测 EGR-1 蛋白表达；将 Tax 及其突变体 M22 和 M47 分别转染 293T 细胞，24h 后免疫印迹检测 EGR-1 蛋白表 达。结果：成功构建了不同长度及突变体的 EGR-1 调控序列荧光素酶报告基因；荧光素酶报告基因检测显示，相 对于 E1 、E2 而言，E3 、DelE 、MutE 的荧光素酶活性明显降低，加入BAY 11-7082 后，E1 、E2 的荧光素酶活性 明显降低(P ＜0.01)，而E3 、DelE 、MutE 无明显变化；免疫印迹检测显示，加入 BAY 10-7082 后，EGR-1 蛋白表 达明显降低；相对于野生型和 M47 ，转染M22 突变体后，293T 细胞 EGR-1 蛋白表达明显降低。结论：NF-κB 是 Tax 蛋白阳性 T 细胞中 EGR-1 表达调控的关键核因子。 关键词：医学免疫学；成人 T 淋巴细胞白血病病毒 1 型；Tax 蛋白；早期生长反应基因-1 ；核因子κB Regulative Mechanism of EGR-1 in the HTLV-1 Virus Tax Protein-Positive T cells 1,2 1 2 2 WANG Hui , HAN Jingxian , NIU Zhiguo , LIU Wei , GAO Cai2, SONG Xiangfeng2 (1. School of Laboratory Medicine, Xinxiang Medical University, Xinxiang 453003, China; 2. Research Center for Immunology, Xinxiang Medical University, Xinxiang 453003, China) Abstract: The objective is to explore the expression and regulation mechanism of early growth response gene-1 in the HTLV-1 virus Tax protein-positive T cells TaxP. Methods: Build EGR-1 reporter gene regulatory sequences of different length and tansfected them into Tax P cells, add NF-κB inhibitor BAY 11-7082 or DMSO of equivalent volume, then collect cells after 24 hours and