碱性成纤维细胞生长因子对成骨细胞粘附特性影响的实验的研究.pdfVIP

中国修复重建外科杂志000515 中国修复重建外科杂志 CHINESE JOURNAL OF REPARATIVE AND RECONSTRUCTIVE SURGERY 2000　Vol.14　No.5　P.305-307 碱性成纤维细胞生长因子对成骨细胞粘附特性影响的实验研究 郑磊　王前　魏宽海　裴国献　胡罢生　颜晓慧 　　【摘　要】　　目的　针对骨组织工程中成骨细胞与基质材料间促 粘 附问题，研 究碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对成骨细胞粘附特性的影响。方法　取兔骨髓基 质干细胞来源的成骨细胞体外培养，分别用5、10、50、100 及200 ng/ml浓度的bFGF诱 导培养24小时作为实验组；不含bFGF的 培养基作为对照组。观察接种后0.5、1、2、4 及8小时各时间点成骨细胞粘附情况，体视学 计量粘附细胞数量。结果　10 ng/ml bFGF 诱导后，细胞粘附细胞数增加最 明显，显著高于对照组（P＜0.01）。随着bFGF浓度 增加，细胞粘附数并不相应增加， 100 ng/ml bFGF诱导后，细胞粘附数与对照组无明显 差异；200 ng/ml bFGF诱导后，细胞粘 附数显著低于对照组（P＜0.01）。 结论bFGF具 有调节成骨细 胞粘附特性的作用，10 ng/ml的bFGF诱导可促进成骨细胞与基质材料间 粘附，200 ng/ml 的b FGF诱导不利于成骨细胞粘附。该结果对骨组织工程研究中，促进 成骨细胞与基质材料间 粘附具有重要意义。 　　【关键词】　　碱性成纤维细胞生长因子　　成骨细胞　　细胞粘附　　 组织工 程 THE INFLUENCE OF BASIC FIBROBLAST GROWTH FACTOR ON THE ADHESION CHARA CTERISTICS OF OSTEOBLASTS IN RABBIT China, 510515 file:///E|/qk/zgxfcjwkzz/zgxf2000/0005/000515.htm（第 1／6 页）2010-3-23 17:06:14 中国修复重建外科杂志000515 adhesion. Tissue engineering 　　骨缺损的治疗一直是骨科界的难题之一，以往采用的方法，如自体骨移植、同种 异体骨 移植 和生物材料替代等，均在不同程度上存在来源困难、免疫排斥及成骨能力 不确定等缺点 ［1］。近年来，随着细胞生物学、分子生物学及材料科学等相关学科的 发展，骨组织工 程研究取得突飞猛进的发展，为骨缺损的修复带来了革命性的变化。 目前，骨组织工程的研 究多集中在成骨细胞特性研究和生物骨基质材料研制两大领 成骨细胞与细胞外基质材料间相互作用的相关研究尚未给予足够的重视，而成骨细胞 ［2］ 的粘 附，是其以后分化、增殖及分泌等一系列功能的基础 。碱性成纤维细胞生长 性，但对bFGF是否影响成骨细胞粘附的研究尚少见。 　　以往的研究表明，bFGF能够促进内皮细胞在材料和ECM上的粘附，且与bFGF促 ［3］ 进内皮细胞表 达粘附分子β1整合素有关 。因此，我们设想bFGF可能也对成骨细 胞的粘附 特性产生影响，从而可能在骨组织工程研究中寻求到一种有效调节成骨细胞 在基质材料上粘 附特性的手段。定量研究bFGF诱导培养后成骨细胞与基质材料间粘附 特性，是我们实验的主 要目的。 1　材料与方法 1．1　主要试剂 　　bFGF（珠海东大生物制剂公司）；RPMI-1640（Gibco）；新生牛血清（杭州四季 青生物制 品公司）；地塞米松（Sigma）；β-甘油磷酸钠(Sigma)。 1．2　成骨细胞分离与培养 　　取6月龄新西兰大白兔双侧股骨骨髓，在RPMI-1640培养基（含10%小牛血清）中 -8 进行原代 培养，用含有10 mol/L地塞米松和10 mmol/L β-甘油磷酸钠的条件培养基进 1．3　细胞粘附特性实验分组 　　将b