高致病性猪繁殖和呼吸综合征病毒HBR株不同代次细胞毒人工感染猪试验.pdfVIP

401 养猪生产与猪病防治专题 0 T030042 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HBR 株不同代次细胞毒人工感染猪试验 危艳武范培虎郭龙军 吴洪丽 刘长明 (中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，黑龙江哈尔滨150001) 目的 本研究旨在阐明高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRsV)HBR毒株在体外传代过程中发生的 毒力变化，以及病毒基因序列的变异情况，进而对弱毒疫苗的研制提供一定的科学指导。 材料方法 养物进行人工感染试验，以颈部肌肉注射和滴鼻途径接种，剂量为2×104～TCID50／头，同设未接种病毒 对照组。各组试验猪隔离饲养，逐日记录临床症状、测直肠温度，每周测量体重，不同时间点采集血清 样品进行病毒血症和抗体水平检测。病毒接种后第28天迫杀试验猪，取各种脏器进行病理学检查和病毒 分布测定。同时对此3个不同代次毒株进行基因序列测定及比对。 结果 结果表明，低代次(第5和10代)病毒接种组可复制出以“高热综合征”为特点的症候群，第5代病 毒接种组死亡率达40％，第10代接种组临床症状明显减轻且无死亡现象；第125代病毒接种组未出现明 显临床表现。病毒血症检测显示，这3个代次的毒株接种组猪于接种后3d均呈阳性。病毒体内分布检测 表明，主要存在于脾脏、扁桃体、淋巴结等免疫器官。病理学观察显示，低代次病毒接种组多种脏器出 现严重的病理损伤，高代次(125代)毒株接种组仅在少数免疫器官出现轻微的病理损伤。基因序列分 析显示，这3个不同代次毒株间ORF5基因序列同源率为99．7％，推导的氨基酸序列出现3个氨基酸突变位 保守，未见变异现象。 讨论 动物感染试验表明，低代次的HBR株感染猪能够完全复制出了典型的以“猪高热综合征”，而高代 次毒株接种猪无明显临床症状，表明该毒株经细胞传代毒力明显下降。鉴于高代次HBR猪接种猪在毒 血症和脏器病毒核酸检测中仍存在大量病毒，因此以本研究获得的第125代毒株作为疫苗种毒仍存在一 定毒力，需要进一步驯化致弱。