三种獐牙菜属植物中6种苷类成分的HPLC法测定.pdfVIP

三种獐牙菜属植物中6种苷类成分的HPLC法测定 王延花L2，孙菁19周国英L2，韩友吉L2，纪兰菊1，陈桂琛1·‘ (1中国科学院西北高原生物研究所，青海省青藏高原特色生物资源研究重点实验室， 西宁810001：2中国科学院研究生院，北京100049) 摘要：采用反相高效液相色谱法对三种獐牙菜属植物四教獐牙菜、红直獐牙菜和歧伞 獐牙菜中的6种苷类成分进行了同时分离，并测定了其含量．色谱柱为Kromasil CII mmx250 (4．6 ram,5岬)，以乙腈-水(舍0．01％甲酸)为流动相进行梯度洗脱，流速1．0 mlJmin，检测波长260ILrn，柱温为25℃．实验结果显示6种成分均达到基线分离，线 性良好，该方法快速，准确．重复性好，结果准确，可靠，可为獐牙菜属药材的深度 开发利用及药理活性物质的全面理解提供科学依据． 关键词：RP-HPLC；四数獐牙菜；红直獐牙菜；歧伞獐牙菜；苷类成分 龙胆科(Gentianace∞)獐牙菜属㈣舭L．)植物，广泛分布于西藏、青海、四川等地区【¨。 该属多种植物以全草入药，主要用于治疗各种急慢性肝炎、肝硬化、肝腹水等各种肝胆疾病 12]。已有研究表明，从獐牙菜属植物中分离出的化学物质主要有各种苷类物质，如：獐牙菜 苦苷、芒果苷、龙胆苦苷、当药黄素等和各种口山酮类物质[31，现代药理学研究表明，獐 牙菜苦苷、龙胆苦苷和獐牙菜苷具有抗菌和清除自由基的能力降习；芒果苷有抗糖尿病抑制 肿瘤的作用【6。7l；异荭草苷有显著的调节低血糖症的能力【81；当药黄素对CCL4引起的转氨酶 升高有降低作用[91。对于这些物质在四数獐牙菜、红直獐牙菜中的分布及含量已有一些报道 [IO-11】，但尚未见有关歧伞獐牙菜中此类物质的分布及含量的报道。本文采用I强．HPLC,激J 同一生境下四数獐牙菜、红直獐牙菜、歧伞獐牙菜中的6种主要苷类成分进行了同时分离和 测定，为今后更好的深入开发与利用獐牙菜属植物提供科学的依据。 1．仪器与试剂 1．1仪器 检测器(岛津公司)；Class．VP液相色谱工作站(岛津公司)；Milli-Q超纯水装置。 基金项目：国家中西部专项(2001BA90iA47)资助项目 ‘通讯作者：Tel：0971--6143900；E-mail：gcchen@,nwipb．ac．饥 1．2试剂 獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷购自中国药品生物制品检定所；芒果苷、异荭草苷、 当药黄素由中国科学院西北高原生物研究所孙洪发研究员赠送，纯度经HPLC面积归一化法 测定，均大于98％。水为重蒸水并经0．45 pm滤膜过滤；乙腈(山东禹王试剂公司)为色谱纯； 其他试剂均为分析纯。 1．3样品来源 三种獐牙菜植物均于2007年7月份采于青海省平安县，原植物标本经中国科学院西北高 Maxim．)、红直獐牙 原生物研究所卢学峰副研究员分别鉴定为四数獐牙菜(Swertiatetraptera 菜@erythrostictaMaxim．)与歧伞獐牙菜@dichotomaL．)。 2．结果与方法 2．1色谱条件 色谱柱为Kromasilmmx250 C18(4．6 ram,5pm)；流动相为乙腈一水(含0．01％甲酸)溶液， llm；流速 梯度洗脱程序为：0—50min，乙腈的体积分数由12％上升至100％；检测波长260 1．0mL／min：柱温25℃。 2．2对照品和供试品溶液的配制 对照品溶液的制备：精确称取对照品适量，用甲醇溶解并配制成一定质量浓度的对照品 储备液，分别用甲醇溶液稀释成质量浓度为：獐牙菜苦苷1．00 mg／mL、芒果苷0．54mg／mL、 龙胆苦苷1．00 rag／rag、当药黄素