5-氟尿嘧啶改变胰岛β细胞的超微结构并抑制胰岛素的释放.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2011，27(1)：119—123 · ll9 · [文章编号] 1000-4718(2011)01—0l19—05 5一氟尿嘧啶改变胰 岛 I3；细胞的超微结构并抑制 胰 岛素的释放术 冯觉平 ， 林 梅 ， 袁响林 ， 王亚萍 ， 方 静 ， 李 敏 (华‘中科技大学同济医学院附属普爱医院肿瘤科 ，湖北 武汉430034； 华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤中心，湖北 武汉 430030) [摘 要] 目的：探讨5一氟尿嘧啶(5一Fu)抑制小鼠胰岛B细胞 (NIT一1细胞)胰岛素分泌的相关分子机 制。方法：不同剂量的5一FU作用于NIT一1细胞，放射免疫分析法检测细胞胰岛素分泌功能的变化；AnnexinV／ PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡；透射电镜观察细胞超微结构的变化；RT—PCR及Westernblotting检测胰十二 指肠同源盒蛋白一1(PDX一1)mRNA和蛋白的表达。结果：5．0—40．0mg／L的5一FU作用24h后，低浓度葡萄糖 (5．6mmol／L)环境下，NIT一1细胞胰岛素分泌无明显下降(P0．05)；而高浓度葡萄糖(16．7mmol／L)刺激下的胰 岛素分泌量可被5．0—40．0mg／L5一FU以剂量依赖性的方式所抑制 (P0．01)。细胞凋亡率明显增高 (P 0．05)；透射电镜可见线粒体结构改变；经 10．0—40．0mg／L的5一Fu作用24h后，PDX一1mRNA及蛋白表达的水 平均有不同程度的下降(P0．05)。结论：5一Fu可通过诱导细胞凋亡、导致 8细胞超微结构改变及数量减少而 抑制胰岛p细胞高糖刺激下的胰岛素释放。下调PDX—J基因表达可能是5一FU在高糖条件下诱导 B细胞凋亡 的机制之一。 [关键词] 氟尿嘧啶；NIT一1细胞 ；胰岛素分泌；超微结构；胰腺十二指肠同源盒蛋白质 1 [中图分类号] R363 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2011．O1．023 Inhibitoryeffectof5--fluorouracilon ultra．．microstructureandinsulin secretionofpancreatic13cells FENGJue—ping ，LIN Mei，YUAN Xiang—lin ，WANGYa—ping ，FANGJing ，LI Min (DepartmentofOncology，PuaiHospital，Ton~iMedicalCollege，HuazhongUniversityofScienceTechnology，Wuhan 430034，China；CenterofOncology，TongfiHospital，TongfiMedcialCollege，HuazhongUniversityofSceinceandTech— noloyg ，Wuhan430030，hCina．E—mail：feng]ueping@163．corn) [ABSTRACT] AIM：ToinvestigatethemolecularmechanismsofBcelldysfunctioninducedby5一fluorouracil(5 一 FU)inisletBcellline(NIT一1cells)．METHODS：TheNIT一1cellsweretreatedwithdifferentconcentrationsof5 一 FU．Thecontentofinsulinintheculturemediumwasdeterminedbyradioimmunoassay．Cellapoptosiswasobservedbv flowcytometrywithannexinV／PIstaining．Th eultra—microstrnctural changesofNIT—lcellswereobservedundertrans． missi