ACSL3在前列腺癌细胞系中的表达及其对前列腺癌转移的影响.pdfVIP

· 250 · 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2014，30(2)：250-255 [文章编号] 1000—4718(2014)02—0250·06 ACSL3在前列腺癌细胞系中的表达 及其对前列腺癌转移的影响 李 科 ， 陈 怡 ， 董 艳。， 叶志强 (中山大学附属第三医院 泌尿外科 ，急诊科 ，广东 广州510630；。中山大学孙逸仙纪念医院乳腺外科 ，广东 广州 510120； 暨南大学生命科学技术学院生物工程系，广东 广州 510632) [摘 要] 目的：观察比较长链脂酰辅酶 A合成酶3(1ong—chainacyl-CoAsynthetase3，ACSL3)在前列腺正常 上皮细胞和不同类型前列腺癌细胞系中的表达差异，通过构建ACSL3基因稳定表达的前列腺癌细胞株研究ACSL3 对前列腺癌细胞侵袭能力的影响。方法：利用RT．PCR方法检测ACSL3mRNA在前列腺正常上皮细胞 、局限性及 转移性前列腺癌细胞中的表达情况 ，分析其表达与前列腺癌发生、进展及转移的关系；以前列腺癌细胞基因组cD- NA为模板 ，通过PCR扩增ACSL3基因，重组构建含有Flag标签的pCDNA3．1(+)一Flag．ACSL3质粒，包装慢病毒 ， 转染前列腺癌细胞 ，通过荧光显微镜、RT—PCR和Westernblotting等方法鉴定ACSL3在细胞内的表达情况；利用Tr- answell侵袭实验研究ACSL3对前列腺癌细胞侵袭能力的改变。结果：较前列腺正常上皮细胞 ，各种前列腺癌细胞 中ACSL3mRNA表达均明显下降。同时，局限性前列腺癌细胞中ACLS3mRNA表达较转移性前列腺癌细胞明显 升高；此外，雄激素非依赖性前列腺癌细胞比雄激素依赖性前列腺癌细胞中ACLS3mRNA表达显著降低。进而，我 们成功构建和包装了表达ACSL3基因的pCDNA3．1(+)F·lag—ACSL3重组质粒及慢病毒，并转染前列腺癌细胞，筛 选出稳定表达株 ；并且，通过 Transwell实验证实 ACSL3表达与前列腺癌细胞的侵袭能力呈负相关。结论 ：前列腺 正常上皮细胞及不同前列腺癌细胞系中ACSL3的表达存在明显差异，提示 ACSL3可能在前列腺癌的发生发展中 起重要作用；成功构建了ACSL3基因稳定表达的前列腺癌细胞株，并初步证实ACSL3过表达可以抑制前列腺癌细 胞的侵袭力。 [关键词] 前列腺肿瘤 ；长链脂酰辅酶A合成酶3；肿瘤侵袭 [中图分类号] R363 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000．4718．2014．02．010 RoleofACSL3expressioninsuppressingprostatecancercellmetastasis LIKe。，CHEN Yi，DONG Yan ，YEZhi—qiang4 (DepartmentofUrology，DepartmentofEmergency，TheThirdAffiliatedHospitalofSunYat—senUniversity，Guangzhou 510630，China；DepartmentofBreastSurgery，SunYat—senMemorialHospitalofSunYat—senUnenity，Guangzhou 510120，China；Departmentof Biotechnology，Schoolof LifeScienceandTechnology，finanUniversity，Guangzhou 510632，China．E—mail：zqye@163．corn) [ABSTRACT] AIM ：Toanalyzethedifferenceoflong—chainacyl—CoAsynthetase3(ACSL3)expressionbetween normal prostateepithelialcellsandprostatecancercells．METHODS：ACL